| 信号肽序列对毕赤酵母表达外源蛋白质的影响 |
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| 引用本文： | 熊爱生 彭日荷 等. 信号肽序列对毕赤酵母表达外源蛋白质的影响[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(2): 154-160 |
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| 作者姓名： | 熊爱生 彭日荷 等 |
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| 作者单位： | 上海市农业科学院生物技术研究中心、上海市农业遗传育种重点实验室 上海201106(熊爱生，彭日荷，李贤，范惠琴，姚泉洪)，华东理工大学生物工程学院 上海200237(郭美锦)，华东理工大学生物工程学院 上海200237(张嗣良) |
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| 基金项目： | 上海市科委重大项目 (No.9939130 0 2 )，上海永业农科生物工程公司资助~~ |
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| 摘 要： | 乙醇氧化酶启动子被分离、克隆 ,并建立了转化方法后 ,毕赤酵母已被发展成为一种高效的外源蛋白表达宿主。为了进一步提高外源蛋白质的分泌表达 ,对信号肽序列进行了研究。首先按毕赤酵母的偏爱密码合成了酿酒酵母的α因子信号肽序列MF4I,随后在MF4I信号肽序列的N端分别引入 1～ 10个毕赤酵母Aox1蛋白质的N端氨基酸 ,构成 10种不同的分泌信号肽序列 ,10种不同的分泌信号肽序列被用于植酸酶基因的毕赤酵母分泌表达。以上新的信号肽序列都可使植酸酶的分泌表达量增加 ,而以N端增加A、I、P三个氨基酸的信号肽序列引起的提高最大 ;和野生型的酿酒酵母α因子信号肽序列相比 ,使植酸酶分泌表达量增加 5倍 ,摇瓶中植酸酶的分泌表达量为 90mg/L。此外在MF4I信号肽的引导序列和内切蛋白酶间增加了EEAEAEAEP和K共 10个氨基酸 ,进一步提高信号肽的分泌效率 ,使表达又提高约 35 % ,使得摇瓶中酸性植酸酶的表达量达到 12 0mg/L ,是pPCI9K表达量的 8倍。
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| 关 键 词： | 毕赤酵母 信号肽序列 表达载体 高效表达 |
Influence of Signal Peptide Sequences on the Expression of Heterogeneous Proteins in Pichia pastoris |
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| XIONG Ai-Sheng,PENG Ri-He,LI Xian,FAN Hui-Qin,YAO Quan-Hong GUO Mei-Jin ,ZHANG Si-Liang. Influence of Signal Peptide Sequences on the Expression of Heterogeneous Proteins in Pichia pastoris[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(2): 154-160 |
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| Authors: | XIONG Ai-Sheng PENG Ri-He LI Xian FAN Hui-Qin YAO Quan-Hong GUO Mei-Jin ZHANG Si-Liang |
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| Affiliation: | XIONG Ai-Sheng,PENG Ri-He,LI Xian,FAN Hui-Qin,YAO Quan-Hong * GUO Mei-Jin 1,ZHANG Si-Liang 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pichia pastoris synthetic signal sequence expression vector high expression |
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