| 重组人EGF-IL-18融合蛋白的表达纯化及复性 |
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| 引用本文： | 潘建华,彭颖,郑昭暻,吕建新.重组人EGF-IL-18融合蛋白的表达纯化及复性[J].细胞生物学杂志,2006,28(5):711-716. |
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| 作者姓名： | 潘建华 彭颖 郑昭暻 吕建新 |
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| 作者单位： | 温州医学院细胞与分子医学研究所 浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院细胞与分子医学研究所，浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院细胞与分子医学研究所，浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院细胞与分子医学研究所，浙江省医学遗传学重点实验室，温州325035，温州325035，温州325035，温州325035 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;浙江省医药卫生科技计划 |
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| 摘 要： | 融合基因EGF-IL-18与表达载体pET32a( )连接构建融合型原核表达质粒pET32a( )-EGF-IL-18。该基因在E.coliRosetta(DE3)中获得高效表达,SDS-PAGE分析表明表达产物大部分以包涵体形式存在。以2mol/L尿素和1%TritonX-100对包涵体进行反复洗涤后,利用离子交换柱层析对包涵体进行柱上复性,结果表明离子交换层析柱上复性不仅能够获得可溶性的EGF-IL-18融合蛋白,而且产物同时得到纯化,纯度大于90%。复性的EGF-IL-18经分子筛进一步纯化后,体外实验证明具有促进人外周血单个核细胞(PBMC)IFN-g基因表达的能力。该方法简单、高效,为进一步开展EGF-IL-18的动物实验及其大量纯化制备打下基础。
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| 关 键 词： | EGF-IL-18融合蛋白 包涵体 离子交换柱层析 柱上复性 |
| 收稿时间： | 2006-03-08 |
| 修稿时间： | 2006年3月8日 |
Expression, Purification, and Refolding of Recombinant Human EGF-IL-18 Fusion Protein in E. coli |
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| Jian-Hua Pan,Ying Peng,Zhao-Jing Zheng,Jian-Xin Lu.Expression, Purification, and Refolding of Recombinant Human EGF-IL-18 Fusion Protein in E. coli[J].Chinese Journal of Cell Biology,2006,28(5):711-716. |
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| Authors: | Jian-Hua Pan Ying Peng Zhao-Jing Zheng Jian-Xin Lu |
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| Institution: | Institute of Cellular and Molecular Medicine, Zhejiang Provincial Key Laboratory of Medical Genetics, Wenzhou Medical College, Wenzhou 325035, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | EGF-IL-18 fusion protein inclusion body ion-exchange chromatography on-column refolding |
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