| 人apoA-Ⅰ基因启动子转录上调剂筛选系统的建立与应用 |
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| 作者姓名： | 邓婷 纪伟 连霁虹 郭雷 胡蔚蓉 龚邦强 |
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| 作者单位： | 1. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
2. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;上海凯曼生物科技有限公司,上海,200233 |
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| 基金项目： | 致谢：本实验工作主要在上海凯曼生物科技有限公司开展,因此感谢该公司的员工的协助,特别要感谢张国晶博士的指导. |
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| 摘 要： | PCR扩增含有apoA-Ⅰ基因的转录调控序列的启动子片断（376 bp）,克隆入含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,构成受apoA-Ⅰ启动子调控的重组报告基因质粒pGL3B-neo：：apo,稳定转染人肝癌细胞株HepG2。通过细胞有限稀释法筛选稳定表达荧光素酶活性的细胞株SAPOA-Ⅰ。经apoA-Ⅰ转录调控因子PPARα激动剂的鉴定和细胞接种密度、溶剂使用浓度等条件的优化,成功建立了靶向apoA-Ⅰ基因启动子转录活性的报告基因筛选体系。应用该体系对400多种降脂中药提取物进行筛选,泽泻、罗布麻叶、山楂等提取物显示出较好的上调活性,与文献报道采用动物模型研究的结果一致。
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| 关 键 词： | 载脂蛋白ApoA-Ⅰ apoA-Ⅰ启动子 荧光素酶报告基因 药物筛选 降脂中药 |
| 文章编号： | 1001-6880（2007）05-0776-05 |
| 收稿时间： | 2007-01-04 |
| 修稿时间： | 2007-01-25 |
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