| 淀粉液化芽孢杆菌b-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆及表达的优化 |
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| 引用本文： | 李永仙,谢焱,朱林江,张一心,顾国贤,李崎. 淀粉液化芽孢杆菌b-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆及表达的优化[J]. 生物工程学报, 2009, 25(4): 542-548 |
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| 作者姓名： | 李永仙 谢焱 朱林江 张一心 顾国贤 李崎 |
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| 作者单位： | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院酿酒科学与工程研究室; |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA020204);;国家科技支撑计划(Nos.2007BAK36B01,2008BAI63B06)资助~~ |
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| 摘 要： | 为了比较不同的表达系统对β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bgl)的效果,本研究将高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amylolique faciens BS5582的bgl基因(GenBank Accession No.EU623974)克隆到3种不同的质粒载体中,即构建pEGX-4T-1-bgl、pET20b(+)-bgl和pET28a(+)-bgl重组质粒。比较了pEGX-4T-1-bgl在不同Escherichiacoli宿主中表达效果,以及pET20b(+)-bgl和pET28a(+)-bgl在E.coliBL21(DE3)中的表达效果。结果表明,E.coliBL21(DE3)-pET28a(+)-bgl能够表达最高的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶活,其总酶活可达(322.0±8.8)U/mL,是出发菌在最适摇瓶发酵条件下产酶活的40.1%。对该重组菌的产酶条件进行了分析,结合IPTG和乳糖协同的诱导作用,在基础产酶培养基中产最高总酶活为(1883.3±45.8)U/mL,表明其具有良好的工业应用价值。
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| 关 键 词： | 淀粉液化芽孢杆菌 β-1 3-1 4-葡聚糖酶 克隆表达 大肠杆菌 |
| 收稿时间： | 2008-04-08 |
Optimization of cloning and expression of b-glucanase gene from Bacillus amyloliquefaciens BS5582 |
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| Yongxian Li,Yan Xie,Linjiang Zhu,Yixin Zhang,Guoxian Gu and Qi Li. Optimization of cloning and expression of b-glucanase gene from Bacillus amyloliquefaciens BS5582[J]. Chinese journal of biotechnology, 2009, 25(4): 542-548 |
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| Authors: | Yongxian Li Yan Xie Linjiang Zhu Yixin Zhang Guoxian Gu Qi Li |
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| Affiliation: | Laboratory of Brewing Science and Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China;Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Wuxi 214122, China; Laboratory of Brewing Science and Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China;Laboratory of Brewing Science and Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China;Laboratory of Brewing Science and Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China;Laboratory of Brewing Science and Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China;Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Wuxi 214122, China; Laboratory of Brewing Science and Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus amyloliquefaciens b-glucanase cloning and expression Escherichia coli |
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