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流行性乙型脑炎病毒E蛋白主要抗原域的原核表达与间接ELISA检测方法的初步建立
作者姓名:郑其升  杨耀武  周斌  曹瑞兵  陈溥言
作者单位:南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室,南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室,南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室,南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室,南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室 江苏南京210095,江苏南京210095中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京100052,江苏南京210095,江苏南京210095,江苏南京210095
基金项目:国家“863”高技术发展计划资助项目(2001AA249012)
摘    要:重组质粒pET-E转化宿主菌BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包含体的形式获得高效表达。通过Westernblotting检测证明表达产物具有良好的抗原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测JEV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳稀释度为1:2000,血清的最佳稀释度为1:200,待检血清阳性标准初步定为:OD490nm>1.2,且待检血清与阴性血清的OD490nm比值大于2。

关 键 词:流行性乙型脑炎病毒E抗原 原核表达 间接ELISA
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