体外循环血浆对类中性粒细胞趋化和CXCR4表达的影响

为研究体外循环血浆对类中性粒细胞趋化功能和CXCR4表达的影响,选择体外循环下心内直视手术(CPB组)和超声引导下外科微创室间隔缺损封堵术(N-CPB组)的患儿各12例,收集手术前后血浆,采用Transwell细胞培养系统测定其对体外培养的类中性粒细胞的趋化效应,并采用流式细胞术和Western blot测定经血浆刺激后类中性粒细胞表面趋化因子受体4chemokine(C-X-C motif)receptor 4,CXCR4]蛋白质及其磷酸化水平的变化,运用RT-q PCR检测CXCR4 m RNA水平。结果表明,CPB血浆对类中性粒细胞趋化效应明显增强,T1和T2时刻趋化指数分别为3.89±0.77和7.68±1.55,CXCR4特异性拮抗剂AMD3100对这一增强效应有抑制作用;CPB血浆刺激后,类中性粒细胞表面CXCR4蛋白质及其磷酸化水平均明显升高,但其m RNA水平未发生明显变化。体外循环血浆可激活类中性粒细胞CXCR4信号通路,其机制与增加细胞表面CXCR4蛋白质及其磷酸化水平有关,但与其m RNA水平无关,这一机制可能与体外循环过程中中性粒细胞向肺部和其他血管外组织浸润有关。