| 小鼠T-bet逆转录病毒载体的构建与功能验证 |
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| 引用本文： | 张雪洁,张建华,张伟,郭洁,周旭宇.小鼠T-bet逆转录病毒载体的构建与功能验证[J].生物工程学报,2014,30(10):1586-1593. |
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| 作者姓名： | 张雪洁 张建华 张伟 郭洁 周旭宇 |
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| 作者单位： | 1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101；2 安徽大学生命科学学院，安徽 合肥 230039;1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101;1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101;1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101;1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2012CB917102) 资助。 |
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| 摘 要： | 为在小鼠细胞中表达并研究T-bet功能,首先构建了含有报告基因Thy1.1的小鼠T-bet逆转录病毒载体,并将构建的载体质粒转染病毒包装细胞系包装成重组病毒,再利用重组病毒分别感染NIH-3T3和D9细胞系检测其感染能力。之后,使用该重组病毒感染T-bet敲除小鼠的CD4+T淋巴细胞,流式细胞术检测T-bet及其下游靶基因Ifng的表达情况。经验证,重组的逆转录病毒感染T-bet敲除小鼠T淋巴细胞后可以在细胞中表达T-bet,并进一步引起下游靶基因Ifng的表达上调,证明本研究中外源表达的转录因子T-bet具有正常功能。综上所述,本实验成功构建了含有报告基因的小鼠T-bet重组逆转录病毒载体,为进一步在小鼠细胞中研究T-bet功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | T-bet 逆转录病毒 γ干扰素 |
| 收稿时间： | 2013/12/18 0:00:00 |
Construction and characterization of a novel recombinant retroviral vector expressing mouse T-bet |
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| Xuejie Zhang,Jianhua Zhang,Wei Zhang,Jie Guo and Xuyu Zhou.Construction and characterization of a novel recombinant retroviral vector expressing mouse T-bet[J].Chinese Journal of Biotechnology,2014,30(10):1586-1593. |
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| Authors: | Xuejie Zhang Jianhua Zhang Wei Zhang Jie Guo and Xuyu Zhou |
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| Institution: | 1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; 2 School of Life Science, Anhui University, Hefei 230039, Anhui, China;1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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