| H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控 |
| |
| 引用本文： | 王洁,董新波,高丽晓,周冬生,殷喆,张义全.H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控[J].微生物学报,2016,56(1):143-149. |
| |
| 作者姓名： | 王洁 董新波 高丽晓 周冬生 殷喆 张义全 |
| |
| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所, 病原微生物生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事医学科学院微生物流行病研究所, 病原微生物生物安全国家重点实验室, 北京 100071,中国人民解放军总装备部科技信心研究中心门诊部, 北京 100142,军事医学科学院微生物流行病研究所, 病原微生物生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事医学科学院微生物流行病研究所, 病原微生物生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事医学科学院微生物流行病研究所, 病原微生物生物安全国家重点实验室, 北京 100071;江苏大学医学院, 江苏镇江 212013 |
| |
| 基金项目： | 病原微生物生物安全国家重点实验室开放研究基金(SKLPBS1438,SKLPBS1437);江苏大学高级专业人才科研启动基金(14JDG166) |
| |
| 摘 要： | 【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp1的转录调控关系。进而采用引物延伸实验研究hcp1的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对hcp1的调控关系。PCR扩增hcp1的整个启动子区DNA序列,并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-H-NS对hcp1启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】Western blot和实时定量RT-PCR结果显示H-NS能抑制hcp1的表达;引物延伸结果显示hcp1只有一个转录起始位点T(–62)(翻译起始位点为+1),且其转录活性是H-NS和σ54依赖性的;EMSA实验表明H-NS对hcp1的启动子区具有直接的结合作用。【结论】H-NS能直接结合到hcp1启动子区而抑制其转录表达。
|
| 关 键 词： | 副溶血弧菌 H-NS hcp1 转录调控 |
| 收稿时间： | 2015/3/31 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2015/5/28 0:00:00 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《微生物学报》下载免费的PDF全文 |
|
