| 高表达Snail蛋白诱导黑色素瘤EMT细胞模型的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 方瑞,郭强,杜军. 高表达Snail蛋白诱导黑色素瘤EMT细胞模型的构建及鉴定[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(7): 1-7 |
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| 作者姓名： | 方瑞 郭强 杜军 |
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| 作者单位： | 中山大学药学院 广州 510006 |
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| 基金项目： | 国家"973"计划，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建稳定表达Snail蛋白的可用于肿瘤上皮-间质化研究的肿瘤细胞模型.方法:采用亚克隆方法从质粒pCMV6-mSnail中PCR扩增小鼠Snail基因,连接至表达质粒pL-tdTomato-Neo,筛选重组质粒并经双酶切及测序鉴定.构建成功的重组质粒pL-tdTomato-mSnail转染小鼠黑色素瘤B16细胞,G418筛选稳定细胞株.采用荧光定量PCR和Western blot技术检测胞内Snail及上皮/间质标志物的变化.建立裸小鼠皮下移植瘤模型,活体成像系统观测移植瘤.结果:重组质粒pL-tdTomato-mSnail成功构建,其稳定转染株B16/dT-mSN胞体发出强烈红色荧光.胞内Snaill水平显著上调,E-钙粘蛋白下调,波形蛋白表达上调,呈现典型的上皮-间质化表型.结论:成功获得稳定高表达小鼠Snail蛋白的EMT细胞模型,且可用于体内外荧光成像观测,为研究Snail蛋白在介导肿瘤EMT过程中的生物作用提供了重要的实验工具.
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| 关 键 词： | 稳定细胞株 Snail 黑色素瘤 上皮-间质转化 荧光成像 |
| 收稿时间： | 2013-03-25 |
Construction and Verification of an Inducible EMT Model in Mouse Melanoma Stably Overexpressing Snail |
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| FANG Rui,GUO Qiang,DU Jun. Construction and Verification of an Inducible EMT Model in Mouse Melanoma Stably Overexpressing Snail[J]. China Biotechnology, 2013, 33(7): 1-7 |
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| Authors: | FANG Rui GUO Qiang DU Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Stable cell line Snail Melanoma EMT Fluorescence imaging |
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