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产肠毒素大肠杆菌亚单位疫苗3STaM(G)-K99和3STaM(S)-K99的纯化及其免疫学性质的研究
引用本文:郭乐,刘昆梅,李敏,赵辉,徐广贤,段相国,韩学波,杨华,王玉炯. 产肠毒素大肠杆菌亚单位疫苗3STaM(G)-K99和3STaM(S)-K99的纯化及其免疫学性质的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(7): 18-24
作者姓名:郭乐  刘昆梅  李敏  赵辉  徐广贤  段相国  韩学波  杨华  王玉炯
作者单位:1. 宁夏大学生命科学学院 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 银川 750021;2. 宁夏医科大学检验学院 宁夏检验医学研究所 银川 750004
基金项目:国家自然科学基金项目资助项目,the National Natural Science Foundation of China
摘    要:产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是一种导致新生犊牛和仔猪腹泻的主要病原体之一.ETEC的毒力因子主要有黏附素(CFs)、不耐热性肠毒素(LT)和耐热性肠毒素(ST)三种.在前期研究中,利用PCR和酶切连接技术成功构建了两种ETEC亚单位疫苗3STaM (G)-K99和3STaM(S)-K99,且在大肠杆菌中获得高效表达.本研究利用阴离子交换层析纯化融合蛋白3STaM (G)-K99 and 3STaM(S)-K99,辅以弗氏佐剂免疫新西兰大白兔,通过Elisa分析其免疫学性质,并利用肠毒素中和实验在昆明系乳鼠中评价其激发抗STa中和抗体的能力.实验结果表明:亚单位疫苗3STaM(G)-K99 and 3STaM (S)-K99能够激发相对较高水平、可针对天然STa、ETEC和融合蛋白STa-K99的特异性抗体.其次,亚单位疫苗中STa突变体(STaM)组分的肠毒素活性显著降低,且其所激发的特异性抗体属于中和抗体,能有效抑制天然STa的肠毒素活性.亚单位疫苗3STaM (G)-K99 and 3STaM(S)-K99为研制预防ETEC感染性腹泻的多价基因工程疫苗提供了基本素材和理论指导.

关 键 词:产肠毒素大肠杆菌  黏附素  不耐热性肠毒素  耐热性肠毒素  中和抗体  
收稿时间:2013-04-01

Purification and Immunologic Study of Subunit Vaccines 3STaM (G)-K99 and 3STaM (S)-K99 with Tandem Copies of Mutant Heat-stable Enterotoxin STa and Colonization Factor K99 from Enterotoxigenic Escherichia coli
GUO Le,LIU Kun-mei,LI Min,ZHAO Hui,XU Guang-xian,DUAN Xiang-guo,HAN Xue-bo,YANG Hua,WANG Yu-jiong. Purification and Immunologic Study of Subunit Vaccines 3STaM (G)-K99 and 3STaM (S)-K99 with Tandem Copies of Mutant Heat-stable Enterotoxin STa and Colonization Factor K99 from Enterotoxigenic Escherichia coli[J]. China Biotechnology, 2013, 33(7): 18-24
Authors:GUO Le  LIU Kun-mei  LI Min  ZHAO Hui  XU Guang-xian  DUAN Xiang-guo  HAN Xue-bo  YANG Hua  WANG Yu-jiong
Abstract:
Keywords:Enterotoxigenic Escherichia coli  Colonization factor antigens  Heat-labile enterotoxin  Heatstable enterotoxin  Neutralizing antibody
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