| 百子莲ApSPI基因原核表达及其重组菌的抗逆性研究 |
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| 引用本文： | 李蕊莲,陈冠群,申晓辉.百子莲ApSPI基因原核表达及其重组菌的抗逆性研究[J].西北植物学报,2020,40(7):1087-1096. |
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| 作者姓名： | 李蕊莲 陈冠群 申晓辉 |
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| 作者单位： | (上海交通大学 设计学院， 上海 200240) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31670694)； |
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| 摘 要： | 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine Protease Inhibitor,SPI)通过抑制靶蛋白活性参与调节内源蛋白平衡,并在植物发育、防御机制中发挥重要作用。该研究利用RACE技术克隆获得百子莲(Agapanthus praecox ssp.orientalis)ApSPI基因全长序列,构建了E.coli Transetta(pET-32a-ApSPI)重组菌株,并检测重组菌株在不同非生物胁迫下的耐受性。结果显示:(1)ApSPI基因全长为652 bp,开放阅读框为366 bp,编码122个氨基酸。(2)ApSPI蛋白含有一个N端信号肽和一个典型的Kazal结构域,是一种Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂。重组蛋白最佳诱导温度为37℃,诱导时间6 h,IPTG浓度为0.1 mmol·L~(-1),且主要以可溶性形式存在。(3)重组菌非生物胁迫耐受性研究发现,重组菌Transetta(pET-32a-ApSPI)对NaCl(200～400 mmol·L~(-1))、KCl(200～400 mmol·L~(-1))和PEG6000(5%)的耐受性明显高于对照菌株Transetta(pET-32a)。研究表明,过表达ApSPI蛋白增强了大肠杆菌对盐、干旱胁迫的抗性,为进一步研究ApSPI在植物抗逆中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 百子莲 丝氨酸蛋白酶抑制剂 原核表达 非生物胁迫 抗逆性研究 |
Prokaryotic Expression of ApSPI Gene from Agapanthus praecox ssp. orientalis and Analysis of Stress Tolerance of Recombinant Bacteria |
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| LI Ruilian,CHEN Guanqun,SHEN Xiaohui.Prokaryotic Expression of ApSPI Gene from Agapanthus praecox ssp. orientalis and Analysis of Stress Tolerance of Recombinant Bacteria[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2020,40(7):1087-1096. |
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| Authors: | LI Ruilian CHEN Guanqun SHEN Xiaohui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Agapanthus praecox serine protease inhibitor prokaryotic expression abiotic stress resistance research |
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