适冷海洋细菌交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)MB-1内切葡聚糖酶基因的克隆和表达 |
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作者姓名: | 游银伟 汪天虹 |
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作者单位: | 山东大学生命科学学院 微生物技术国家重点实验室 济南 250100 |
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摘 要: | 从黄海深海海底淤泥中筛选出一株产纤维素酶的适冷革兰氏阴性杆菌MB1,克隆和分析了MB1的16S rDNA序列(GenBank接受号:AY551321),经鉴定为交替假单胞菌(Pseudoalteromonas),命名为Pseudoalteromonas sp.MB1。克隆了该菌适冷内切葡聚糖酶基因celA(GenBank接受号:AY551322),并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中进行了表达。重组E.coli菌体破碎后,获取上清液,其中融合蛋白GSTCelA浓度约为78.5mg/L。分析了融合酶GSTCelA的性质,其最适反应温度为35℃,最适反应pH值为72,为中性适冷酶。实验结果为交替假单胞菌低温纤维素酶的基础理论和应用研究奠定了基础。
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关 键 词: | 海洋适冷酶,交替假单胞菌,内切葡聚糖酶,融合蛋白表达 |
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