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| 人尿激酶原全长cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达 | |
| 引用本文： | 李风知,李秀珍,唐宏娣,张宏权,胡宝成,韩素文,俞炜源,方继明,黄翠芬.人尿激酶原全长cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达[J].生物工程学报,1991,7(2):114-119. |
| 作者姓名： | 李风知 李秀珍 唐宏娣 张宏权 胡宝成 韩素文 俞炜源 方继明 黄翠芬 |
| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所，北京 |
| 摘 要： | 通过磷酸钙共沉淀技术，将含有尿激酶原cDNA的表达载体(pSV2-PrUK)与含有二氢叶酸还原酶基因的表达质粒pSV2-dhfr-或MMTV—dhfr共转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株(CHO-dhfr-)。利用选择培养基选择出二氧叶酸还原酶基因表达阳性(dhfr+)的转化细胞灶。用溶解圈法测定尿激酶型纤溶酶原激活剂(u—PA)的生物活性，其中两株显著高于其他株细胞，命名为CLF-14和CLF-8，表达水平依次为24Iu／106细胞／48h，16Iu／106细胞／48h。用ELLSA测定CLF一14和cLF-8细胞上清，表现为强阳性，阳性值比阴性对照值(P／N)大于10，CLF-14和CLF-8细胞表达量分别为0．14-o．22μg／106细胞／48h和0．08-O．14μg／106细胞／48h。分泌产物能被抗尿激酶(UK)血清抑制，而不被抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的抗血清和正常兔血清抑制。 |
| 关 键 词： | 尿激酶原cDNA CHO-dhfr-细胞 基因表达 |
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