生米卡链霉菌变株丙酰化酶基因的克隆和表达

麦迪霉素产生菌生米卡链霉菌(streptomyces mycarofaciens)变株具有丙酰化酶活性，可以将螺旋霉素转化为丙酰螺旋霉素。为了进行丙酰化酶基因克隆，本实验以质粒pIJ702为载体通过鸟枪克隆法将变株DNA片段克隆至变铅青链霉菌TK54(Streptomyces livdansTK54)，经薄层层析和高压液相色谱分析结果表明，在转化子中，N0．9菌株可以将螺旋霉素转化为丙酰螺旋霉素，这证明丙酰化酶基因已在变铅青链霉菌TK54中克隆并得到初步表达，№．9重组质粒插入DNA片段为4．16kb，经southern杂交表明确实来源于变株。此外还构建了N0．9重组质粒的限制酶酶切图谱。