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苏云金芽孢杆菌B-Pr-88菌株中cry2Ab4基因的表达和杀虫活性研究
引用本文:李长友,张杰,宋福平,韩岚岚,李国勋,黄大昉. 苏云金芽孢杆菌B-Pr-88菌株中cry2Ab4基因的表达和杀虫活性研究[J]. 微生物学报, 2007, 23(4)
作者姓名:李长友  张杰  宋福平  韩岚岚  李国勋  黄大昉
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094;莱阳农学院植保学院,青岛 266109;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100094;莱阳农学院植保学院,青岛 266109;中国农业科学院生物技术研究所,北京 100081
基金项目:国家973项目(No.2003CB114201)和国家自然科学基金项目(No. 30571252)资助。
摘    要:以我室自行分离的对鳞翅目夜蛾科害虫具有高毒力的Bt菌株B-Pr-88为材料,用PCR-RFLP方法从其质粒DNA文库中筛选到含cry2Ab基因的一个阳性克隆pZF858,序列测定发现,该片段含有cry2Ab全长基因,开放读码框为1902bps,编码由633个氨基酸组成的70.7kD蛋白,氨基酸同源性与已公布的cry2Ab基因同源性均为99.8%,经Bt基因国际命名委员会正式命名为cry2Ab。根据cry2Ab基因开放阅读框架(ORF)两端序列,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3,PCR扩增获得cry2Ab 完整ORF,与大肠杆菌表达载体pET-21b连接,构建了重组表达质粒pET-2Ab4,质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳证实该基因表达了60kD的蛋白,生物测定表明,Cry2Ab4对棉铃虫和大豆食心虫具有高毒力,同时对小菜蛾和二化螟有一定的杀虫活性,而对亚洲玉米螟和甜菜夜蛾没有杀虫活性。

关 键 词:苏云金芽孢杆菌,cry2Ab4基因,基因克隆,蛋白表达,杀虫活性

Expression and Insecticidal Activity of a Novel Gene cry2Ab4 from Bacillus thuringiensis Strain B-Pr-88
LI Chang-You,ZHANG Jie,SONG Fu-Ping,HAN Lan-Lan,LI Guo-Xun and HUANG Da-Fang. Expression and Insecticidal Activity of a Novel Gene cry2Ab4 from Bacillus thuringiensis Strain B-Pr-88[J]. Acta microbiologica Sinica, 2007, 23(4)
Authors:LI Chang-You  ZHANG Jie  SONG Fu-Ping  HAN Lan-Lan  LI Guo-Xun  HUANG Da-Fang
Abstract:
Keywords:
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