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二化螟Minus-C气味结合蛋白的分子克隆及功能鉴定
引用本文:魏丹,叶占峰,高建清,董双林.二化螟Minus-C气味结合蛋白的分子克隆及功能鉴定[J].昆虫学报,2013,56(7):754-764.
作者姓名:魏丹  叶占峰  高建清  董双林
作者单位:(1. 南京农业大学植物保护学院, 农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室, 南京 210095; 2. 南京农业大学图书馆, 南京 210095)
基金项目:农业部行业科技专项,国家自然科学基金项目
摘    要:气味结合蛋白(odorant binding proteins, OBPs)在昆虫对寄主气味的感受中起重要作用, 但有关Minus-C OBP及其功能的报道很少。本研究通过基因组数据分析并利用RACE技术, 克隆和鉴定了二化螟Chilo suppressalis (Walker)的一个Minus-C OBP基因, 命名为CsupOBP1(GenBank登录号: KC492498)。CsupOBP1基因的开放阅读框长423 bp, 编码141个氨基酸, 其中N端的18个氨基酸为预测的信号肽序列, 成熟蛋白序列中具有4个保守的半胱氨酸位点。实时定量PCR分析显示, 该基因在幼虫头部及成虫雌雄足、 翅和雄性触角等化感组织中高表达, 其中在雄虫触角内的表达量显著高于雌虫触角。利用荧光竞争结合实验对CsupOBP1重组蛋白与38种化合物的结合特性的测定表明, 重组CsupOBP1与β 紫罗兰酮的结合能力最强(Ki=9.53 μmol/L)。触角电位测定表明, 二化螟成虫可对β-紫罗兰酮产生显著的触角电生理反应, 但雄虫反应明显强于雌虫, 与结合试验及雄虫触角中CsupOBP1的表达量显著高于雌虫触角的测定结果相一致。鉴于β-紫罗兰酮是水稻等植物中普遍存在的一种芳香气味组分, 推测CsupOBP1可能通过对该气味的结合和运输, 从而在二化螟对寄主植物的嗅觉定向中起作用。

关 键 词:二化螟  气味结合蛋白  触角电位  组织表达谱  β  紫罗兰酮  荧光竞争结合实验  

Molecular cloning and functional identification of a Minus-C odorant binding protein from the rice striped stem borer, Chilo suppressalis (Lepidoptera: Pyralidae)
WEI Dan,YE Zhan-Feng,GAO Jian-Qing,DONG Shuang-Lin.Molecular cloning and functional identification of a Minus-C odorant binding protein from the rice striped stem borer, Chilo suppressalis (Lepidoptera: Pyralidae)[J].Acta Entomologica Sinica,2013,56(7):754-764.
Authors:WEI Dan  YE Zhan-Feng  GAO Jian-Qing  DONG Shuang-Lin
Institution:(1. Key Laboratory of Integrated Management of Crop Diseases and Pests, Ministry of Education, College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. Library of Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)
Abstract:
Keywords:Chilo suppressalis  odorant binding protein  electroantennogram  tissue expression pattern  beta-ionone  fluorescence competitive binding assay
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