| SPARC基因敲除小鼠的繁育及子代基因型的鉴定 |
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| 引用本文： | 罗盘,罗振,赵秀华,肖娜,程腊梅.SPARC基因敲除小鼠的繁育及子代基因型的鉴定[J].现代生物医学进展,2010,10(3). |
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| 作者姓名： | 罗盘 罗振 赵秀华 肖娜 程腊梅 |
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| 作者单位： | 1. 中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,410078
2. 中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,410078;人类干细胞国家工程研究中心,湖南,长沙,410078 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30771053); 中南大学研究生创新基金(2009ssxt103) |
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| 摘 要： | 目的:探讨富含半胱氨酸的分泌型酸性蛋白(SPARC)基因敲除小鼠的繁殖和鉴定方法,为进一步研究SPARC蛋白的功能奠定基础。方法:将所引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型。提取子鼠鼠尾基因组DNA,用PCR法扩增SPARC和Neo基因片段,通过限制性内切酶酶切反应,证实PCR扩增产物的正确性;应用Westernblot检测SPARC蛋白质的表达,进一步证实PCR鉴定方法的可靠性。结果:SPARC基因杂合子小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,SPARC基因缺失纯合子小鼠有繁殖能力。琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR产物分子量大小与预期的目的基因片段相对分子质量大小一致,酶切和Westernblot结果证实PCR结果可靠。结论:PCR方法能够准确鉴定SPARC基因突变小鼠基因型。
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| 关 键 词： | 富含半胱氨酸的分泌型酸性蛋白 基因敲除 基因型鉴定 |
Breeding of SPARC Knockout Mice and Gene Identification of Filial Generation |
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| LUO Pan,LUO Zhen,ZHAO Xiu-Hua,XIAO Na,Cheng La-Mei.Breeding of SPARC Knockout Mice and Gene Identification of Filial Generation[J].Progress in Modern Biomedicine,2010,10(3). |
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| Authors: | LUO Pan LUO Zhen ZHAO Xiu-Hua XIAO Na Cheng La-Mei |
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| Institution: | LUO Pan1,LUO Zhen1,ZHAO Xiu-Hua1,XIAO Na1,Cheng La-Mei1,2 (1.Institute of Reproductive & Stem Cell Engineering,Central South University,Changsha 410078: 2.National Engineering &Research Center of Human Stem Cells,Changsha 410078,China) |
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| Abstract: | Objective:To explore the ideal breeding way of Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine (SPARC) knockout mice and identify mice with SPARC gene mutant for laying a foundation for studying the role of SPARC. Methods:Breed and propagate the introduced heterozygote mice. Crosses between heterozygotes produced three genotype offsprings: heterozygotes, homozygous and wild-type. The genome DNA extracted from the tails of filial generation mice and PCR method was employed to amplify the SPARC and Neo gene frag... |
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| Keywords: | SPARC knockout gene identification |
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