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嗜热真菌Thermomyces lanuginosus A236热稳足葡萄糖淀粉酶的纯化及其特性
作者姓名:杨依军 李多川 严琨 彭友良 沈崇尧
作者单位:天津市植物保护研究所 天津 300112;中国农业大学植物科技学院 北京 100094
摘    要:嗜热真菌Thermomyces lanuginosus A2a6在液体培养基中50℃下静止培养14天,粗提酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Toyopearl离子交换层析、Butyl-Toyopearl疏水层析、Sephacryl S100凝胶过滤和FPLC Mono Q离子交换层析,得到了凝胶电泳均质的葡萄糖淀粉酶。酶促反应产物经TLC分析为葡萄糖,证明纯化的酶为葡萄糖淀粉酶(EC 3.2.1.3)。SDS-PAGE测定其分子量为72,000,不具亚基,pI为4.0,富含val和Leu。酶反应最适温度和pH分别为70℃和5.0。在pH5.0条件下,酶在60℃保温lh,仍具有原酶活性。酶活性在70℃和80℃的半衰期分别为20min和6min, Ca2+对酶有激活作用,Fe3+、Al3+、Hg2+等金属离子对酶活力有一定的抑制作用。纯酶碳水化合物含量为12.4%。纯酶可水解可溶性淀粉,直链淀粉、支链淀粉.糊精、糖原、麦芽三糖和麦芽糖,其中可溶性淀粉为最适底物。

关 键 词:嗜热真菌,Thermomyces lanuginosus  葡萄糖淀粉酶
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