| 用小鼠模型分析表达牛结核分枝杆菌Ag85B重组腺病毒的细胞免疫特性 |
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| 引用本文： | 周海霞,陈祥,季琰,周卫东,胡茂志,黄金林,潘志明,焦新安. 用小鼠模型分析表达牛结核分枝杆菌Ag85B重组腺病毒的细胞免疫特性[J]. 微生物学报, 2010, 50(6): 811-816 |
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| 作者姓名： | 周海霞 陈祥 季琰 周卫东 胡茂志 黄金林 潘志明 焦新安 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州,225009
2. 扬州大学测试中心,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家“973项目”（2006CB504404）；国家科技重大专项（2008ZX10003-010）；公益性行业科研专项（200903027）；江苏省科技攻关计划（BE2007340） |
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| 摘 要： | 【目的】构建表达牛结核分枝杆菌抗原Ag85B重组腺病毒rAd-Ag85B,并用小鼠模型分析其细胞免疫特点。【方法】采用PCR方法,扩增结核分枝杆菌Ag85B的编码基因fbpB,测序后构建pDC516-Ag85B重组质粒。利用脂质体将pDC516-Ag85B与pBHGfrtΔE1,3FLP共转染Ad293细胞包装成重组病毒rAd-Ag85B。空斑纯化后用电镜负染、目的基因转录和蛋白表达进行rAd-Ag85B验证。同时将rAd-Ag85B和rAd(wtAd)分别经皮下注射免疫BALB/c小鼠,二免二周后取小鼠脾脏细胞,进行CD69表面分子表达、淋巴细胞增殖和ELISPOT实验分析。【结果】在电镜下能观察到包装的重组病毒粒子,且在转录和蛋白水平上验证了rAd-Ag85B构建成功。免疫试验结果显示,rAd-Ag85B能激活CD4+T和CD8+T细胞表面分子CD69的表达,并引起淋巴细胞增殖。ELISPOT表明rAd-Ag85B呈现Th1免疫特点。【结论】成功构建的rAd-Ag85B能引起机体针对PPD蛋白或Ag85B多肽的Th1免疫应答。
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| 关 键 词： | 关键词：抗原Ag85B；牛结核分枝杆菌；重组腺病毒；γ干扰素；CD69 |
| 收稿时间： | 2009-11-23 |
| 修稿时间： | 2010-01-24 |
Construction of recombinant adenovirus expressing Ag85B of Mycobacterium bovis and its cellular immunoproperties in mice |
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| Haixia Zhou,Xiang Chen,Yan Ji,Weidong Zhou,Maozhi Hu,Jinlin Huang,Zhiming Pan,Xin'an Jiao. Construction of recombinant adenovirus expressing Ag85B of Mycobacterium bovis and its cellular immunoproperties in mice[J]. Acta microbiologica Sinica, 2010, 50(6): 811-816 |
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| Authors: | Haixia Zhou Xiang Chen Yan Ji Weidong Zhou Maozhi Hu Jinlin Huang Zhiming Pan Xin'an Jiao |
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| Affiliation: | Jiangsu Key Lab of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Lab of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Lab of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Test Center of Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Test Center of Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Lab of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Lab of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Lab of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China |
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