贝类精子质量检测与评价方法研究Ⅰ：染色法检测马氏珠母贝精子的存活率的研究1

用曙红 Y、台盼蓝染料对马氏珠母贝(Pinctada martensii)精子进行染色，通过对不同制片方法、不同的染色时间和不同染料浓度的染色效果进行比较，筛选出可通过染色特征来检测精子死活及活精率的适宜方法，结果显示：(1)经染色后，死、活精子呈现出明显不同的特征：活精子均不着色，头部呈梨形、无色透明状；死精子着红色(曙红Y染色)或蓝色(台盼蓝染色)，体积变大，头部近圆形。(2)曙红Y、台盼蓝最适染色浓度分别为0.04%和0.2%；最佳染色时间均为15min。(3)检测到的精子死亡率即实测精子死亡率，与“理论死亡率”之间有明显的相关性，相关系数为R=0.99(P＜0.01)，并且两种染色法的观察结果一致，表明这些检测结果客观可信；(4)染料对活精子毒性的检测显示，染色45min内，精子死亡率无显著性增加(P＞0.05)，说明在该时间范围内，染液对精子的毒性较小，精子存活率的检测结果稳定可靠。这些研究表明，曙红 Y、台盼蓝两种染色法准确灵敏，均适宜用于马氏珠母贝精子质量的检测与评价。