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实时荧光定量PCR检测人肿瘤细胞NKG2D配体基因表达
引用本文:刘枫,郑冰蓉,杨举伦,王力,陈玥,赵稳兴. 实时荧光定量PCR检测人肿瘤细胞NKG2D配体基因表达[J]. 生物磁学, 2011, 0(19): 3621-3624
作者姓名:刘枫  郑冰蓉  杨举伦  王力  陈玥  赵稳兴
作者单位:[1]云南大学生命科学学院,云南昆明650091 [2]解放军昆明总医院病理科,云南昆明650032
基金项目:云南省自然科学基金(2010ZC186)
摘    要:目的:建立人肿瘤细胞NKG2D配体基因(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)表达的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitativePCR)检测方法。方法:根据NCBI基因库中NKG2D配体基因序列,设计合成引物。用Trizo1法从培养的肿瘤细胞(BEC-7402、HeLa、MDA-MB-435、XWLC-05)中提取总RNA,逆转录成eDNA,建立实时荧光定量PCR检测NKG2D配体基因表达的方法,并检测NKG2D配体在肿瘤细胞株中的表达。结果:经过琼脂糖凝胶电泳、熔解曲线和标准曲线分析,用所设计的引物和SYBR GreenI能够特异扩增和定量检测NKG2D配体基因的表达。该方法成功检测4种肿瘤细胞NKG2D配体基因的表达。结论:建立了人NKG2D配体基因表达的实时荧光定量PCR检测方法,为进一步研究人NKG2D配体在肿瘤免疫中的作用提供了有效手段。

关 键 词:NKG2D配体  实时荧光定量PCR  肿瘤细胞

Real-Time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Human NKG2D Ligand mRNA Quantification
LIU Fen,ZHENG Bing-rong,YANO Ju-lun,WANG Li,CHEN Yue,ZHAO Wen-xing. Real-Time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Human NKG2D Ligand mRNA Quantification[J]. Biomagnetism, 2011, 0(19): 3621-3624
Authors:LIU Fen  ZHENG Bing-rong  YANO Ju-lun  WANG Li  CHEN Yue  ZHAO Wen-xing
Affiliation:1 College of Life Science, Yunnan University 650091 Kunming, China; 2 Department ofpathology, Kunming general hospital of PLA, 650032, Kunming, China )
Abstract:
Keywords:NKG2D ligand  Real-time fluorescence quantitative PCR  Tumor cell
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