利用Tn5定位诱变筛选紫云英根瘤菌Exo-变种

利用Tn5定位诱变方法，对质粒Pjb-B5进行Tn5插入诱变，得到10个Tn5在5.9kbB5外源片段上有不同插入位点的质粒TN1-1,TN1-12,TN2-2,TN2-3,TN3-1，TN4-1,TN9-|1,TN10-1,TN13-1,TN14-1。将Tn1-1等分别转移到已经含有不相容质粒Pph1ji的紫云英根瘤菌107菌株中，使之发生同源变换。通过抗性选择及表型鉴别，筛选到3株菌落表型干燥(Muc^-)的酸性胞外多糖(EPS)合成缺陷菌株(Exo^-)107(TN2-2),107(TN10-1),107(TN13-1).Southern杂交分析证明这3株变种的Tn5插入确实是同源交换而不是转座产生，表明经过适当改良的Tn5定位诱变法可以应用于紫云英根瘤菌Exo-变种的筛选。