首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
   检索      

原代小鼠肝脏细胞的高效分离纯化与培养*
引用本文:张钰付亮鲁超锁涛宋陆军.原代小鼠肝脏细胞的高效分离纯化与培养*[J].现代生物医学进展,2014,14(6):1005-1008.
作者姓名:张钰付亮鲁超锁涛宋陆军
作者单位:(复旦大学附属中山医院普外科上海200032
基金项目:上海市科学技术委员会基金项目(09ZR1405900)
摘    要:摘要目的:建立一种能稳定获得高活力和高纯度原代小鼠肝脏细胞的分离、纯化及培养方法。方法:应用改良的Seglen 二步法原 位灌注和机械离心分离肝脏细胞,并用改良的高糖DMEM培养基进行培养。台盼蓝拒染法检测接种时肝脏细胞的存活率,倒置 显微镜动态观察肝脏细胞形态变化,应用免疫荧光技术对肝脏细胞进行Albumin 染色。结果:每只小鼠可获取肝脏细胞的总产量 平均为1.35× 106 / g体重,肝脏细胞存活率> 90%。倒置显微镜下观察贴壁前肝细胞直径为35.14 滋m± 4.35 滋m,肝脏细胞在接种 后3 h基本完成贴壁;肝脏细胞接种后24h,所有肝脏细胞均强阳性表达成熟肝脏细胞标志物Albumin,肝细胞纯度> 95%。结 论:改良的分离纯化及培养方法能稳定获得高产量、高活率及高纯度的小鼠肝脏细胞。

关 键 词:肝脏细胞  原代细胞培养  分离  纯化  小鼠
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
点击此处可从《现代生物医学进展》浏览原始摘要信息
点击此处可从《现代生物医学进展》下载免费的PDF全文
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号