| 荒漠甲虫小胸鳖甲抗冻蛋白的酵母表达及应用 |
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| 引用本文： | 孟闪闪,蔡文萍,马纪. 荒漠甲虫小胸鳖甲抗冻蛋白的酵母表达及应用[J]. 生物工程学报, 2015, 31(8): 1255-1265 |
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| 作者姓名： | 孟闪闪 蔡文萍 马纪 |
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| 作者单位： | 新疆大学生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830046,新疆大学生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830046,新疆大学生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 31360527)，新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题 (No. XJDX0201-2014-03) 资助。 |
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| 摘 要： | 昆虫抗冻蛋白(Antifreeze protein,AFP)的抗冻活性很高,可应用于生物组织和细胞的低温保存。为了在酵母中表达荒漠甲虫小胸鳖甲Microdera punctipennis抗冻蛋白Mp AFP698,并确定其在低温下的保护作用,本文通过构建真核表达载体p PIC9K-Mpafp698,转化巴斯德毕赤酵母GS115,诱导表达小胸鳖甲抗冻蛋白Mp AFP698。利用免疫印迹(Western blotting)分析Mp AFP698蛋白的特异性表达,结果显示Mpafp698基因可整合到酵母基因组中并分泌表达,且酵母自身蛋白很少分泌表达。检测抗冻蛋白的低温保护作用,结果发现,小胸鳖甲抗冻蛋白可显著改善冷冻小鼠肝脏等器官的细胞形态,降低血细胞在4℃的溶血率,提高SF9细胞冻融后的存活率。本研究表明,小胸鳖甲AFP可以在毕赤酵母中分泌表达,便于纯化,有良好的低温保护效果。
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| 关 键 词： | 抗冻蛋白，低温保存，应用，巴斯德毕赤酵母，血细胞 |
| 收稿时间： | 2014-10-20 |
Yeast expression and application of an antifreeze protein from the desert beetle Microdera punctipennis |
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| Shanshan Meng,Wenping Cai and Ji Ma. Yeast expression and application of an antifreeze protein from the desert beetle Microdera punctipennis[J]. Chinese journal of biotechnology, 2015, 31(8): 1255-1265 |
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| Authors: | Shanshan Meng Wenping Cai Ji Ma |
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| Affiliation: | Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang, China,Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang, China and Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | antifreeze proteins cryopreservation application Pichia pastoris blood cell |
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