| 抑癌基因NDRG2对人结肠癌细胞系Caco-2增殖的影响 |
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| 引用本文： | 李剑英,吴琳,徐欣元,张健,沈岚.抑癌基因NDRG2对人结肠癌细胞系Caco-2增殖的影响[J].现代生物医学进展,2013,13(8). |
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| 作者姓名： | 李剑英 吴琳 徐欣元 张健 沈岚 |
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| 作者单位： | 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 陕西西安710032 |
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| 摘 要： | 目的:采用重组慢病毒系统,在过表达和抑制NDRG2 (N-myc downstream regulated gene 2)基因后,检测人结肠癌细胞系Caco-2的增殖情况.方法:分别采用NDRG2过表达慢病毒载体pLenti6-NDRG2和NDRG2干涉慢病毒载体pLKO.1-shNDRG2制备病毒并感染Caco-2细胞,经14天耐药的筛选,获得稳定感染的细胞株；采用Real time RT-PCR和Western blot方法明确NDRG2在稳转细胞株中的表达情况,同时采用MTT方法检测细胞的增殖能力,通过流式细胞仪检测细胞周期变化情况.结果:Real time RT-PCR和Western blot结果表明,在慢病毒pLenti6-NDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2表达上调；pLKO.1-shNDRG2稳定感染的Caco-2细胞中,NDRG2的表达下调.MTT实验结果表明,NDRG2过表达细胞株中细胞的增殖能力下降,而pLKO.1-shNDRG2慢病毒感染Caco-2后细胞的增殖能力明显增加；流式细胞术结果显示,过表达NDRG2使Caco-2细胞在G0/G1期细胞增多而S期的细胞减少,抑制细胞内源性NDRG2后G0/G1期细胞减少而S期细胞增多.结论:通过过表达和抑制NDRG2基因,验证了NDRG2作为抑癌候选基因能够有效抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖.
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| 关 键 词： | NDRG2 肿瘤 慢病毒 增殖 |
Role of Tumor Suppressor Gene NDRG2 in Proliferation of Human Colon Carcinoma Cell Cine Caco-2 |
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