| 基于悬液芯片系统的新城疫病毒强、弱毒高通量检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 孙建军,刘天龙,郭浩,刘小雷.基于悬液芯片系统的新城疫病毒强、弱毒高通量检测方法的建立[J].现代生物医学进展,2013,13(9):1609-1614. |
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| 作者姓名： | 孙建军 刘天龙 郭浩 刘小雷 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古医科大学 内蒙古呼和浩特010000
2. 中国检验检疫科学研究院 北京100123 |
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| 基金项目： | 国家教育部"春晖计划"项目，内蒙古自治区自然科学基金项目，内蒙古自治区科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:利用悬液芯片系统建立一种高通量检测新城疫病毒强、弱毒的方法并将该方法的灵敏度与传统的酶联免疫反应(ELISA)进行比较.方法:将F48E9和LaSota单克隆抗体通过共价偶联的方式连接到聚苯乙烯微球的表面构成捕获抗体,利用捕获抗体、检测物、生物素化的多抗及链霉亲和素化的藻红蛋白建立双抗夹心的免疫检测模式.检测物作为抗原与捕获抗体结合后与生物素化的新城疫多抗进行反应,反应完成后,用链霉亲和素标记的荧光探针对反应产物进行标记得到悬液芯片系统的检测物.结果:微球包被实验结果表明,包被100 μL微球所需F48E9和LaSota单克隆抗体的最佳量分别是14.85 μg和17.65 μg;新城疫病毒多抗的最佳稀释倍数为400倍；悬液芯片检测方法检测NDV强毒的灵敏度为1∶160,弱毒的灵敏度为1∶320;抗体特异性实验表明,该方法所使用的两种捕获抗体的体异性良好.该方法与传统的ELISA在相同灵敏度的前提下,其在检测时间、检测步骤及高通量方面优于ELISA.结论:基于悬液芯片系统的新城疫强、弱毒高通量检测方法的建立对于该病毒的快速诊断具有重要的意义.
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 悬液芯片系统 高通量免疫检测 |
Suspension Array System Based-Multiplexed Immunoassays for the Virulent and Avirulent Strains of Newcastle Disease Virus |
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