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| 具有抗HIV活性的天花粉蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化 | |
| 引用本文： | 安群星,徐志凯,黎志东,穆士杰,张献清,吴兴安.具有抗HIV活性的天花粉蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化[J].生物技术通讯,2006,17(2):167-169. |
| 作者姓名： | 安群星 徐志凯 黎志东 穆士杰 张献清 吴兴安 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学,医学微生物教研室,陕西,西安,710032;第四军医大学,西京医院输血科,陕西,西安,710032 2. 第四军医大学,医学微生物教研室,陕西,西安,710032 3. 第四军医大学,西京医院输血科,陕西,西安,710032 |
| 基金项目： | 陕西省科技计划项目(2003K10G9) |
| 摘 要： | 目的:天花粉蛋白(TCS)有较强的抗HIV活性。利用基因工程技术在大肠杆菌中表达TCS并进行纯化。方法:从新鲜栝楼叶片中获取TCS基因组DNA,利用PCR技术扩增其全长基因,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后与原核表达载体pRSET-A连接,转化感受态E.coliDH5α,提取质粒进行酶切鉴定及测序;将所获阳性重组质粒转化感受态E.coliBL21(DE3)得到工程菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE及Western印迹鉴定;用Ni-NTA柱对所获目的蛋白进行纯化。结果:获得了目的蛋白的可溶性高效表达,并通过了Western印迹鉴定。经Ni-NTA柱纯化后,得到大量均一的6His-TCS融合蛋白。结论:TCS在大肠杆菌中的表达与纯化,为通过基因工程方法研制具有抗HIV活性的药物奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 天花粉蛋白 人类免疫缺陷病毒 原核表达 纯化 |
| 文章编号： | 1009-0002（2006）02-0167-03 |
| 收稿时间： | 2005-11-21 |
| 修稿时间： | 2005年11月21 |
Cloning, Expression and Purification of Trichosanthin in E.coli |
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| AN Qun-xing,XU Zhi-kai,LI Zhi-dong,MU Shi-jie,ZHANG Xian-qing,WU Xing-an.Cloning, Expression and Purification of Trichosanthin in E.coli[J].Letters in Biotechnology,2006,17(2):167-169. | |
| Authors: | AN Qun-xing XU Zhi-kai LI Zhi-dong MU Shi-jie ZHANG Xian-qing WU Xing-an |
| Abstract: | |
| Keywords: | trichosanthin human immunodeficiency virus prokaryotic expression purification |
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