布鲁氏菌LPS合成相关重要蛋白的生物信息学分析及per基因的克隆表达

脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)作为布鲁氏菌(Brucella)重要毒力因子，在布鲁氏菌感染宿主过程中发挥重要作用。本研究通过对布鲁氏菌LPS合成相关重要蛋白进行生物信息学分析，并选择布鲁氏菌LPS O侧链关键基因per进行克隆表达，挖掘布鲁氏菌LPS功能及应用潜力。结果显示，布鲁氏菌LPS合成相关30个重要蛋白主要为无信号肽和跨膜螺旋结构的亲水性蛋白，均具有较强反应原性和甲基化及磷酸化修饰位点；其中18个蛋白(18/30)可发生糖基化修饰，4个蛋白(4/30)可发生乙酰化修饰；亚细胞定位显示，绝大多数蛋白在细胞质中发挥功能，少数在细胞周质及细胞内膜上发挥功能；除Wbpw蛋白外，布鲁氏菌LPS合成相关重要蛋白之间可发生相互作用；构建了pET28a-per重组表达质粒，经诱导在上清液中表达45.7 kDa蛋白，Western Blot验证该蛋白反应原性较强。本研究为布鲁氏菌LPS功能的后续研究及新型疫苗和诊断技术研发提供科学依据。