抑制VEGF基因表达对乳腺癌细胞细胞周期的影响

目的：研究针对VEGF基因的siRNA（small interferenceRNA）对乳腺癌MCF-7细胞细胞周期的影响。方法：依据Promega公司在网上提供的设计软件，设计针对VEGF基因的siRNA，合成DNA模板，体外转录合成siRNA。脂质体转染法将合成的siRNA转染入MCF-7细胞，以未转染细胞以及错义序列siRNAscr转染细胞为对照。用细胞计数法检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响：流式细胞法检测细胞周期变化，RT—PCR法比较转染前后p21、CyclinDl表达水平的变化，Westemblot检测转染前后磷酸化ERK的表达。结果：细胞计数法结果显示，转染24h后siRNA明显抑制MCF-7细胞增殖，转染48h后，抑制效率稳定。siRNA转染后能有效地抑制MCF-7细胞的增殖，阻滞细胞周期于G0／G1期，S期细胞明显减少，G0／G1期细胞比例逐渐增多；p21mRNA表达显著上调，抑制CyclinD1mRNA及磷酸化ERK蛋白的表达。结论：体外转录合成的siRNA可能通过上调细胞周期蚤白激酶抑制剂p21的表达，下调CyclinDl及磷酸化ERK的表达，将细胞周期阻滞于G0／G1期，从而显著抑制MCF-7细胞的增殖。

Inhibition of expression of VEGF gene by siRNA influences cell cycle in breast cancer cells