团头鲂促性腺激素GtH Iβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建 |
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引用本文: | 曲宪成,崔严慧,周正峰,刘颖,金一春,胡萍华,薛婷君,王琼.团头鲂促性腺激素GtH Iβ亚基基因5′端启动子区克隆及表达载体构建[J].水生生物学报,2008,32(4):558-567. |
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作者姓名: | 曲宪成 崔严慧 周正峰 刘颖 金一春 胡萍华 薛婷君 王琼 |
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作者单位: | 上海水产大学生命与科学技术学院,上海,200090 |
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基金项目: | 教育部留学回国人员科研启动基金,上海市重点学科建设项目,上海水产大学校科研和教改项目 |
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摘 要: | 本研究利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Iβ(GtH Iβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHIβ亚基基因5′端侧翼序列长度为479bp,其中包括TATA盒、ARE、PRE、ERE、SF-1、Ptx1等可能对GtH Iβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点。利用PCR方法在基因组中扩增得到了3个缺失片段,并同全长片段一起分别连接至pGL3-Basic报告基因载体,成功构建了团头鲂GtH Iβ亚基基因5′端侧翼序列的表达载体,为进一步研究、分析其转录调控机制提供了基础。
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关 键 词: | 团头鲂 促性腺激素Iβ亚基 5′侧翼序列 启动子 表达载体 |
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