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粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶的分离纯化及酶学性质研究
引用本文:黄乾明,杨婉身,陈华萍,张寒飞,刘一江,谢君. 粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶的分离纯化及酶学性质研究[J]. 微生物学报, 2007, 26(4): 539-548
作者姓名:黄乾明  杨婉身  陈华萍  张寒飞  刘一江  谢君
作者单位:四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014;四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014;华南农业大学测试中心 广州 510642
基金项目:四川省教育厅重点科研项目(No.2002A009,No.2004A026);四川省科学技术厅应用基础项目(No.04JY029-032);四川农业大学青年科技创新基金(No.00731200)
摘    要:粗毛栓菌Trametes gallica诱变菌株SAH-12是通过紫外诱变选育所得的漆酶高产菌株,Active-PAGE分析表明SAH-12在高氮低碳无机盐培养液(LM3)中至少分泌3种漆酶同工酶(Lac1、Lac2、Lac3)。采用硫酸铵盐析、透析和Sephadex-G75分子筛层析从其培养液中分离纯化得到电泳纯的Lac1,纯化倍数6.54,酶活性回收59.7%。Lac1经SDS-PAGE验证为一条带,其表观分子量为61.5kDa。Lac1为一种糖蛋白,含糖量11.6%,等电点pI 4.40,催化氧化底物ABTS的最适反应温度为60℃,最适pH为2.6,Km值为25μmol/L。Lac1在40℃(pH4.0)以下和pH1.5~5.0(28℃)范围内稳定。金属离子Fe2+、Ag+、Hg2+和Cr3+与抑制剂DTT、SDS、EDTA和DMSO对Lac1有抑制作用,其中Fe2+和DTT完全抑制酶活,而Cu2+对酶有明显激活作用,Mn2+、Zn2+对酶活影响不大。Lac1不仅可使一些合成染料明显脱色,而且对苹果汁多酚祛除也有较好效果。40℃用该酶(1U/mL)处理苹果汁5h,其多酚含量可降低40%。

关 键 词:合成染料,脱色,苹果汁,多酚

Purification and characterization of a laccase from the mutated strain SAH-12 of Trametes gallica
HUANG Qian-Ming,YANG Wan-Shen,CHEN Hua-Ping,ZHANG Han-Fei,LIU Yi-Jiang and XIE Jun. Purification and characterization of a laccase from the mutated strain SAH-12 of Trametes gallica[J]. Acta microbiologica Sinica, 2007, 26(4): 539-548
Authors:HUANG Qian-Ming  YANG Wan-Shen  CHEN Hua-Ping  ZHANG Han-Fei  LIU Yi-Jiang  XIE Jun
Abstract:
Keywords:synthetic dyes   decolorization   apple juice   polyphenol
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