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smc5基因敲除斑马鱼肝脏转录组学分析
引用本文:施缘萍,朱文娇,张昌润,彭雅洁,乔 洁. smc5基因敲除斑马鱼肝脏转录组学分析[J]. 现代生物医学进展, 2022, 0(23): 4401-4406
作者姓名:施缘萍  朱文娇  张昌润  彭雅洁  乔 洁
作者单位:上海交通大学医学院附属第九人民医院内分泌科 上海 200011
基金项目:国家自然科学基金项目(81873652);上海市自然科学基金项目(21ZR1438300)
摘    要:摘要 目的:探讨smc5基因敲除对斑马鱼肝脏基因表达谱的影响,进一步明确smc5突变对斑马鱼代谢的影响。方法:用CRISPR/Cas9技术构建smc5基因敲除斑马鱼模型,取3个月的smc5-/-和野生型斑马鱼肝脏进行转录组测序,创建基因表达谱文库,观察smc5基因敲除后斑马鱼肝脏基因表达谱的变化,将筛选出的差异表达基因进行功能富集,并运用荧光定量PCR对KEGG通路中显著的差异表达基因进行验证。结果:成功构建出7号外显子上2碱基缺失造成移码突变的smc5基因敲除斑马鱼模型。RNA-seq发现smc5-/-斑马鱼的肝脏基因表达谱变化显著,包含p53的多个通路激活,如细胞周期和凋亡。糖酵解、脂肪酸降解与代谢、丙酮酸代谢等相关通路显著下调。荧光定量PCR结果与RNA-seq结果一致。结论:smc5基因敲除下调斑马鱼肝脏糖脂代谢。本研究结果为进一步研究SMC5基因在糖脂代谢调控中的潜在机制奠定基础。

关 键 词:CRISPR/Cas9;斑马鱼;smc5;代谢;转录组测序
收稿时间:2022-04-23
修稿时间:2022-05-18

The Hepatic Transcriptome Analysis of smc5 Knockout Zebrafish Model
Abstract:
Keywords:CRISPR/Cas9   Zebrafish   smc5   Metabolism   RNA-seq
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