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发根农杆菌介导的菠菜毛状根遗传转化体系的建立
作者姓名:徐悦  曹英萍  王玉  付春祥  戴绍军
作者单位:1 东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心, 东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室, 哈尔滨 1500402 中国科学院青岛生物能源与过程研究所, 中国科学院生物燃料重点实验室, 山东省能源生物遗传资源重点实验室, 山东省合成生物技术创新中心(筹), 青岛 2660003 上海师范大学生命科学学院, 植物种质资源开发协同创新中心, 上海 200234;
基金项目:青岛市创业创新领军人才(16-8-3-15-zhc);中央高校基本科研业务费专项资金(2572017ET01);上海市科学技术委员会科研计划(17391900600)
摘    要:发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)侵染植物后可诱导植物产生毛状根。菠菜(Spinacia oleracea)是常见的食用蔬菜, 目前尚未见菠菜毛状根的研究报道。经筛选得到适合诱导菠菜毛状根的发根农杆菌菌株LBA9402, LBA9402侵染菠菜外植体茎后, 毛状根的诱导率最高可达16%。菠菜毛状根呈白色, 具有丰富的根毛, 能在无外源激素的固体培养基上快速增殖生长。通过诱导菠菜毛状根产生愈伤组织并进行分化, 获得了菠菜毛状根的再生植株, 再生率为8%。此外, LBA9402可将含有Ri质粒的T-DNA和携带外源GFP基因的Ti质粒T-DNA共同导入外植体中。PCR检测和荧光显微观察结果显示, rolB及GFP基因在菠菜毛状根基因组中稳定表达, 共转化频率为50%。

关 键 词:共转化  毛状根  植物再生体系  菠菜  
收稿时间:2018-11-30
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