| 肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白表达条件的优化及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 马艳,李伟,李小波,鲍冬梅,卢建培. 肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白表达条件的优化及活性鉴定[J]. 生物工程学报, 2016, 32(12): 1715-1726 |
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| 作者姓名： | 马艳 李伟 李小波 鲍冬梅 卢建培 |
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| 作者单位： | 1 广东药科大学 基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室，广东 广州 510006,2 广东药科大学 中药学院，广东 广州 510006,1 广东药科大学 基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室，广东 广州 510006,1 广东药科大学 基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室，广东 广州 510006,1 广东药科大学 基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室，广东 广州 510006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 81502520)，广东省自然科学基金 (No. 2016A030310299) 资助。 |
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| 摘 要： | 为了获得足够多纯度高且有活性的肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白(HTP-r ES),首先研究了BL21/p ET21b-HTP-r ES重组菌株的生长曲线和最佳诱导时机;单因素分析不同p H值、不同诱导时间、不同诱导剂浓度、不同诱导温度时融合蛋白表达量;通过包涵体洗涤、复性、纯化,以获得高纯度的肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白;最后采用流式细胞仪和MTT对融合蛋白进行活性鉴定。结果表明,BL21/p ET21b-HTP-r ES重组菌株在1.5–3.5 h处于对数生长期,培养基p H 8.0、IPTG终浓度0.06 mmol/L、42℃、诱导表达5 h为最佳表达条件。包涵体洗涤后纯度达60%,经复性、纯化后获得的目的蛋白纯度达到95%以上,对人肝癌细胞具有靶向性,能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖。研究确立了融合蛋白最佳表达条件以及复性、纯化条件,为进一步研究其生物学活性及药物开发奠定基础。
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| 关 键 词： | 肝靶向肽，人内皮抑制素，表达条件优化，活性鉴定 |
| 收稿时间： | 2016-04-28 |
Optimization of expression conditions and activity identification of hepatocyte-targeting peptide-human endostatin |
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| Yan M,Wei Li,Xiaobo Li,Dongmei Bao and Jianpei Lu. Optimization of expression conditions and activity identification of hepatocyte-targeting peptide-human endostatin[J]. Chinese journal of biotechnology, 2016, 32(12): 1715-1726 |
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| Authors: | Yan M Wei Li Xiaobo Li Dongmei Bao Jianpei Lu |
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| Affiliation: | 1 Guangdong Key Laboratory of Pharmaceutical Bioactive Substances, School of Basic Sciences, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, Guangdong, China,2 School of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, Guangdong, China,1 Guangdong Key Laboratory of Pharmaceutical Bioactive Substances, School of Basic Sciences, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, Guangdong, China,1 Guangdong Key Laboratory of Pharmaceutical Bioactive Substances, School of Basic Sciences, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, Guangdong, China and 1 Guangdong Key Laboratory of Pharmaceutical Bioactive Substances, School of Basic Sciences, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatocyte-targeting peptide human endostatin expression conditions activity identification |
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