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利用多重筛选机制提高山羊乳腺上皮细胞基因打靶的效率
引用本文:沈伟,闵令江,李兰,潘庆杰,吴晓洁,周艳荣,邓继先.利用多重筛选机制提高山羊乳腺上皮细胞基因打靶的效率[J].遗传学报,2005,32(4):366-371.
作者姓名:沈伟  闵令江  李兰  潘庆杰  吴晓洁  周艳荣  邓继先
作者单位:1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100
2. 西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100;山东莱阳农学院动物科技学院,莱阳,265200
3. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;山东莱阳农学院动物科技学院,莱阳,265200
4. 山东莱阳农学院动物科技学院,莱阳,265200
5. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071
基金项目:国家“863计划”项目(编号: 2002AA206621 )~~
摘    要:构建了山羊β-酪蛋白基因座基因打靶载体pGBC—GFP—neo,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,以及无启动子的GFP基因。打靶载体线性化后用脂质体包裹转染山羊乳腺上皮细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,共得到抗性细胞克隆51个,对抗性克隆利用激素诱导β-酪蛋白基因启动子指导GFP表达,得到GFP表达阳性细胞克隆17个,对其中4个生长状态良好的克隆PCR检测验证后用于核移植,克隆胚发育率为59.5%,部分发育到桑椹胚或囊胚。

关 键 词:山羊  基因打靶  乳腺生物反应器  β-酪蛋白基因
文章编号:0379-4172(2005)04-0366-06

High-efficient Gene Targeting of Goat Mammary Epithelium Cell by the Multi-selection Mechanism
SHEN Wei,MIN Ling-Jiang,LI Lan,PAN Qing-Jie,WU Xiao-jie,ZHOU Yan-rong,DENG Ji-Xian.High-efficient Gene Targeting of Goat Mammary Epithelium Cell by the Multi-selection Mechanism[J].Journal of Genetics and Genomics,2005,32(4):366-371.
Authors:SHEN Wei  MIN Ling-Jiang  LI Lan  PAN Qing-Jie  WU Xiao-jie  ZHOU Yan-rong  DENG Ji-Xian
Abstract:
Keywords:goat  gene targeting  mammary gland bioreactor  beta-casein gene
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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