| 中国东北地区人乳头瘤病毒16型全基因组克隆及HPV16.HaCaT重组细胞模型的构建及初步鉴定 |
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| 引用本文： | 刘淼,吴盈盈,路一平,吴思,王爽,崔畅婉,于淼,孙峥嵘. 中国东北地区人乳头瘤病毒16型全基因组克隆及HPV16.HaCaT重组细胞模型的构建及初步鉴定[J]. 病毒学报, 2021, 37(5): 1051-1059. DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004029 |
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| 作者姓名： | 刘淼 吴盈盈 路一平 吴思 王爽 崔畅婉 于淼 孙峥嵘 |
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| 作者单位： | 中国医科大学附属盛京医院生物样本库,沈阳110000 |
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| 摘 要： | 为构建含东北地区人乳头瘤病毒16型(HPV16)全基因组的HPV16.HaCaT细胞模型,收集中国东北地区HPV16单一感染患者宫颈脱落细胞,提取DNA,将HPV16全基因组分成4个区段,通过4对特异性引物对HPV16全基因组进行分段扩增,测序后进行序列拼接及核酸序列分析,克隆HPV16全基因组序列;通过细胞转染,构建含HPV16全基因组的HPV16.HaCaT重组细胞模型;利用聚合酶链式反应(PCR)和细胞免疫荧光法检测重组细胞内HPV16早期基因的表达.成功克隆出中国东北地区HPV16全基因组序列(GenBank登录号:MW320358);构建了东北地区HPV16全基因组的重组质粒及HPV16.HaCaT重组细胞模型;证明了 HPV16早期基因E1-E4、E5、E6和E7在重组细胞模型内均有表达,从而获得中国东北地区HPV16全基因组序列及含有HPV16全基因组的HPV16.HaCaT重组细胞模型.
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒16型全基因组(HPV16) 表达载体构建 重组细胞模型 聚合酶链式反应(PCR) |
Cloning of the Complete Genome of Human Papillomavirus Type 16 from Patient in Northeast China,and Construction and Preliminary Identification of the Recombinant Cell Model HPV16.HaCaT |
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| LIU Miao,WU Yingying,LU Yiping,WU Si,WANG Shuang,CUI Changwan,YU Miao,SUN Zhengrong. Cloning of the Complete Genome of Human Papillomavirus Type 16 from Patient in Northeast China,and Construction and Preliminary Identification of the Recombinant Cell Model HPV16.HaCaT[J]. Chinese journal of virology, 2021, 37(5): 1051-1059. DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004029 |
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| Authors: | LIU Miao WU Yingying LU Yiping WU Si WANG Shuang CUI Changwan YU Miao SUN Zhengrong |
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