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V型分泌系统菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素及其受体结合位点的确定
引用本文:原志伟 蒋颖 王建业 朱国强. V型分泌系统菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素及其受体结合位点的确定[J]. 微生物学报, 2007, 47(2): 319-323
作者姓名:原志伟 蒋颖 王建业 朱国强
作者单位:扬州大学兽医学院,扬州225009
摘    要:自主转运蛋白(V型分泌系统)的β结构域已被证明可以将异源性多肽展示在细菌表面。运用DNA重组技术优化构建V型分泌系统MisL并在菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素FedF及其受体结合域FedF1。含重组质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1大肠杆菌(E.coli)DH5α经厌氧诱导后,分别与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子血清和F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪的小肠上皮细胞做玻板凝集试验和体外黏附试验,结果表明上述两株诱导表达重组菌与FedF抗血清发生明显的凝集反应,且能较好地黏附于F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪小肠上皮细胞。而菌体表面展示F18大肠杆菌黏附素FedF突变体FedF(M)(黏附素受体结合域第88和89位组氨酸残基双突变为丙氨酸)的重组菌则失去上述凝集和黏附特性。以上试验结果说明,F18大肠杆菌黏附素FedF及其受体结合域FedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,并进一步证明了位于FedF受体结合域内第88和89位组氨酸残基对FedF受体结合域的形成至关重要。

关 键 词:V型分泌系统 自主转运蛋白 菌体表面展示 FedF受体结合域
文章编号:0001-6209(2007)02-0319-05
修稿时间:2006-06-15

Display of the F18 fimbrial adhesin on the bacterial surface using type V secretion system and characterization of the binding domain of the adhesin
YUAN Zhi-wei, JIANG Ying, WANG Jian-ye, ZHU Guo-qiang. Display of the F18 fimbrial adhesin on the bacterial surface using type V secretion system and characterization of the binding domain of the adhesin[J]. Acta microbiologica Sinica, 2007, 47(2): 319-323
Authors:YUAN Zhi-wei   JIANG Ying   WANG Jian-ye   ZHU Guo-qiang
Affiliation:College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China
Abstract:
Keywords:type V secretion system   autotransporter   bacterial surface display   binding domain of fedF for F18 fimbriae
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