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| 人VEGF165基因转染成人成肌细胞的实验研究 | |
| 引用本文： | 陈勇,周建大,邹永华,殷照初,李文波,李明,陈孜孜,李万猛.人VEGF165基因转染成人成肌细胞的实验研究[J].激光生物学报,2010,19(1):68-73. |
| 作者姓名： | 陈勇 周建大 邹永华 殷照初 李文波 李明 陈孜孜 李万猛 |
| 作者单位： | 1. 湖南省计划生育研究所,湖南长沙,410008 2. 中南大学湘雅三医院整形烧伤外科,湖南长沙,410013 3. 中南大学湘雅三医院影像医学科,湖南长沙,410013 |
| 基金项目： | 湖南省自然科学基金重点项目，湖南省科学技术计划项目，湖南省卫生厅科研基金项目 |
| 摘 要： | 目的：将人血管内皮生长因子165（hVEGF165）导人原代离体成肌细胞，观察该细胞hVEGF分泌情况，探讨成人自体转基因成肌细胞移植的可行性。方法：采用两步消化法对成人骨骼肌组织消化获取相对较纯的成肌细胞，通过差速贴壁法进行进一步的纯化。以脂质体转染法将pcDNA3．1-hVEGF165导入成肌细胞，通过RT—PCR、ELISA和Western-blot进行hVEGF165定量检测，MTT测定和Mile’s实验检测VEGF165的生物学活性。结果：转基因细胞经RT—PCR扩增出一条VEGF的特异性泳带，ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度分别达到18．92±1．77rig／mL、19．04±2．15ng／mL，Western blot检测转基因成肌细胞上清均检测到VEGF蛋白特异性的杂交带，MTT显示转基因细胞上清明显促内皮细胞增殖，Mile’s实验显示转基因细胞上清明显增加毛细血管通透性。结论：质粒pcDNA3．1-hVEGF165能成功转入成人成肌细胞，转基因细胞能分泌有生物活性的VEGF165蛋白。 |
| 关 键 词： | 骨骼肌 成肌细胞 血管内皮生长因子 基因表达 |
Human VEGF165 Gene Transfected Adult Myoblasts in vitro |
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| CHEN Yong,ZHOU Jian-da,ZOU Yong-hua,YIN Zhao-chu,LI Wen-bo,LI Ming,CHEN Zi-zi,LI Wan-meng.Human VEGF165 Gene Transfected Adult Myoblasts in vitro[J].ACTA Laser Biology Sinica,2010,19(1):68-73. | |
| Authors: | CHEN Yong ZHOU Jian-da ZOU Yong-hua YIN Zhao-chu LI Wen-bo LI Ming CHEN Zi-zi LI Wan-meng |
| Institution: | 1. The Family Planning Institue of Hunan Province, Changsha 410008, Hunan, China;2. The Third Xiangya Hospital of Central South University a. The Department of Pastic and Burns Surgery, b. The Department of Image Medicine, Changsha 410013, Hunan, China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | skeletal muscle myoblast VEGF gene expression |
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