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重组人IL-1ra在大肠杆菌中的可溶性表达
引用本文:杨志新,周晓巍,朱恒奇,徐秀英,黄培堂. 重组人IL-1ra在大肠杆菌中的可溶性表达[J]. 生物技术通讯, 2004, 15(5): 457-459
作者姓名:杨志新  周晓巍  朱恒奇  徐秀英  黄培堂
作者单位:军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071
摘    要:利用PCR技术从含有IL-1ra的质粒上扩增IL-1ra基因,经过序列测定后插入表达载体pTIG-Trx,并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达。经SDS-PAGE分析显示,IL-1ra表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达产物出现相对分子量大约为17000的一条新生蛋白质带,其大小与预期结果一致,经Western和ELISA分析,证明该带即为目的蛋白,SDS-PAGE显示目的蛋白全部以可溶性蛋白的形式存在。超声破碎后,上清经金属螯和层析纯化获得纯度约为98%的蛋白样品。

关 键 词:IL-1ra 大肠杆菌 蛋白 超声 ELISA 表达质粒 可溶性表达 诱导表达 IPTG 表达载体
文章编号:1009-0002(2004)05-0457-03
修稿时间:2004-02-27

Expression of interleukin-1 receptor antagonist in E.coli
YANG Zhi-xin,ZHOU Xiao-wei,ZHU Heng-qi,XU Xiu-ying,HUANG Pei-tangInstitute of Biotechnology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing ,China. Expression of interleukin-1 receptor antagonist in E.coli[J]. Letters in Biotechnology, 2004, 15(5): 457-459
Authors:YANG Zhi-xin  ZHOU Xiao-wei  ZHU Heng-qi  XU Xiu-ying  HUANG Pei-tangInstitute of Biotechnology  Academy of Military Medical Sciences  Beijing   China
Affiliation:YANG Zhi-xin,ZHOU Xiao-wei,ZHU Heng-qi,XU Xiu-ying,HUANG Pei-tangInstitute of Biotechnology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China
Abstract:Human IL-1ra was expressed from E.coli BL21 transferred with IL-1ra cDNA/pTig-trx, almost all of them is soluble bacterial protein. Through ultrasonic distruption and, most of the expressed recombinant protein was released into supernatant. The protein was purified by immobilized metal ion affimity and get the purifyied protein.
Keywords:human IL-1ra  gene expression
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