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东方肉座菌EU7-22纤维素酶基因的克隆及序列分析
引用本文:龙传南,成奕瑾,邬小兵,刘健,龙敏南.东方肉座菌EU7-22纤维素酶基因的克隆及序列分析[J].生物技术通报,2012,0(11):110-117.
作者姓名:龙传南  成奕瑾  邬小兵  刘健  龙敏南
作者单位:1. 厦门大学能源研究院,厦门,361005
2. 厦门大学生命科学学院,厦门,361005
3. 厦门大学能源研究院,厦门361005;厦门大学生命科学学院,厦门361005
基金项目:国家重点基础研究发展计划("973"计划),中央高校基本科研业务费专项资金项目,国家自然科学基金项目
摘    要:东方肉座菌EU7-22与XC-9、里氏木霉、康宁木霉、黑曲霉、斜卧青霉进行产纤维素酶比较,结果表明菌株EU7-22具有较高的产纤维素酶能力及完整的纤维素酶系.根据里氏木霉和绿色木霉的外切葡聚糖酶,内切葡聚糖酶及β-葡萄糖苷酶相关基因序列,设计引物PCR扩增出菌株EU7-22 cbhⅠ、cbhⅡ、egⅠ、egⅡ及bgl Ⅰ.基因序列经NCBI Blast分析表明,cbhⅠ与绿色木霉cbh1基因(FJ871063)同源性最高达99%;cbhⅡ与康宁木霉cbh2基因(DQ504304)同源性最高达99%;eg Ⅰ与长枝木霉egl基因(GU144298)同源性最高达99%;egⅡ与绿色木霉eg2基因(EF602036)同源性最高达99%;bglⅠ与菌株Trichoderma sp.SSL bgl基因(FJ040193)同源性最高达100%.5种纤维素酶基因编码的相应氨基酸序列与其他木霉纤维素酶的氨基酸序列相似性也非常高.对上述纤维素酶基因编码的相应蛋白的分子量、等电点、N-糖基化位点、信号肽序列进行分析;对纤维素结合区及糖基水解酶家族特征结构区进行了定位;用SWISS-Model模拟了酶蛋白的三级结构.

关 键 词:东方肉座菌  纤维素酶  基因  同源性

Cloning and Sequence Analysis of Cellulase Genes from Hypocrea orientalis EU7-22
Long Chuannan , Cheng Yijin , Wu Xiaobing , Liu Jian , Long Minnan.Cloning and Sequence Analysis of Cellulase Genes from Hypocrea orientalis EU7-22[J].Biotechnology Bulletin,2012,0(11):110-117.
Authors:Long Chuannan  Cheng Yijin  Wu Xiaobing  Liu Jian  Long Minnan
Abstract:
Keywords:
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