| 家蚕二分浓核病毒VD1-ORF4基因截短多肽的表达和抗体制备 |
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| 引用本文： | 李国辉,王鹏,胡朝阳,姚勤.家蚕二分浓核病毒VD1-ORF4基因截短多肽的表达和抗体制备[J].生物技术通报,2012,0(11):172-176. |
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| 作者姓名： | 李国辉 王鹏 胡朝阳 姚勤 |
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| 作者单位： | 江苏大学生命科学研究院,镇江,212013 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，江苏大学高级人才启动基金项目 |
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| 摘 要： | 通过PCR扩增家蚕二分浓核病毒(Bombyx mori bidensovirus,BmBDV)VD1-ORF4基因序列中的两个DNA片段,将测序正确的两个目的片段分别亚克隆到原核表达载体pET-30a上,通过不同浓度的IPTG对含有重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE和Westen blot分析.结果表明,这两个截短多肽都获得了表达,其N-端融合有6个组氨酸.将割胶纯化的蛋白多肽与佐剂充分研磨,以研磨后的匀浆液对昆明小鼠进行皮下多点注射.获得的抗血清分别对原核诱导表达产物进行Western blot分析,结果表明,在特定的位置都能杂交到一条特异的蛋白带,表明制备的两个多抗能为深入研究VD1-ORF4基因的功能提供基础.
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| 关 键 词： | 家蚕二分浓核病毒 VD1-ORF4 原核表达 融合蛋白 抗体制备 |
Cloning and Expression of Partial Sequence from Bombyx mori Bidensovirus VD1-ORF4 Gene in Escherichia coli and Preparation of Its Antibody |
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| Li Guohui
,
Wang Peng
,
Hu Zhaoyang
,
Yao Qin.Cloning and Expression of Partial Sequence from Bombyx mori Bidensovirus VD1-ORF4 Gene in Escherichia coli and Preparation of Its Antibody[J].Biotechnology Bulletin,2012,0(11):172-176. |
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| Authors: | Li Guohui Wang Peng Hu Zhaoyang Yao Qin |
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