| 凝血因子VII基因表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 吕茂民,王娜,王栋,于群,章金刚.凝血因子VII基因表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达[J].中国生物工程杂志,2005,25(1):44-47. |
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| 作者姓名： | 吕茂民 王娜 王栋 于群 章金刚 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院野战输血研究所 |
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| 基金项目： | 军事医学科学院创新基金资助项目 |
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| 摘 要： | 凝血因子Ⅶ是凝血块形成的起始关键分子之一,它对外源性凝血途径的启动具有重要的作用。为表达具有促凝活性的重组人凝血因子Ⅶ,通过PCR的方法从质粒pUC-FⅦ中扩增人凝血因子ⅦcDNA,并将其定向克隆入真核表达载体pIRESneo中,构建重组表达载体pIRES-FⅦ,测序正确后用脂质体介导的方法转染BHK-21细胞,经G418加压筛选、细胞有限稀释等方法获得克隆细胞株,收集无皿清培养上清,进行SDS-PAGE、Western blot和活性鉴定。结果成功构建了重组表达载体pIRES-FⅦ,实现了其在BHK-21细胞中的表达,且表达产物具有促凝活性。重组人凝血因子Ⅶ在哺乳动物细胞中的成功表达,为整体止血剂的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 重组凝血因子Ⅶ BHK-21 表达 |
| 收稿时间： | 2005-10-12 |
| 修稿时间： | 2004年7月26日 |
Construction of Coagulant Factor VII Gene Expression Vector and Expression in BHK Cell Line |
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| LU Mao-min WANG Na WANG Dong YU Qun ZHANG Jin-gang.Construction of Coagulant Factor VII Gene Expression Vector and Expression in BHK Cell Line[J].China Biotechnology,2005,25(1):44-47. |
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| Authors: | LU Mao-min WANG Na WANG Dong YU Qun ZHANG Jin-gang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant human coagulant factor VVVVVVVVVVVVVVVVVII(rhF7777777777777777777777) BHK-21 cell line Expression |
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