| 野生大豆未成熟种子总mRNA的分离及其cDNA的分子克隆 |
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| 引用本文： | 毕玉平,米景九.野生大豆未成熟种子总mRNA的分离及其cDNA的分子克隆[J].遗传学报,1989,16(3):167-173. |
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| 作者姓名： | 毕玉平 米景九 |
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| 作者单位： | 莱阳农学院遗传教研室
(毕玉平)，北京农业大学生物学院
(米景九)，北京农业大学生物学院(郭静成) |
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| 摘 要： | 用氯化锂沉淀法从野生大豆(G.soja)未成熟种子中制备总RNA,经oligo(dT)-纤维素柱亲和层析,获得总mRNA,在兔网织红细胞体系中表现出一定翻译活性。以总mRNA为模板,oligo(dT)_(12)(?)为引物,反转录酶催化合成第一链cDNA,RNase H-DNA聚合酶Ⅰ协同合成第二链cDNA。双链cDNA的长度大约为200—5000 bp,且不存在发夹结构。将双链cDNA修补后钝端连接到pUC 19质粒的Sma 1位点,转化E.coli JM107,获得800多个白色重组子克隆。快速电泳检测及酶切分析表明,多数重组子带有插入片段,其中3个重组子的插入片段长度大致为1700 bp、2600 bp和1400 bp。
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| 关 键 词： | 野生大豆 mRNA cDNA 克隆 |
Isolation of Total mRNA from the Immature Beijing Wild Soybean Seeds and Molecular Cloning of Its Complementary DNA |
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| Bi Yuping Mi Jingjiu Guo Jingcheng.Isolation of Total mRNA from the Immature Beijing Wild Soybean Seeds and Molecular Cloning of Its Complementary DNA[J].Journal of Genetics and Genomics,1989,16(3):167-173. |
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| Authors: | Bi Yuping Mi Jingjiu Guo Jingcheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wild soybean mRNA cDNA Cloning |
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