印楝素A对粉纹夜蛾Hi-5细胞的毒性机理

利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni Hübner卵细胞系（Hi-5细胞系）在细胞水平研究了印楝素(azadirachtin) A杀卵活性的毒性机理。以MTT法研究了印楝素A对粉纹夜蛾Hi-5细胞的生长抑制率，结果表明最初两天印楝素 A对Hi-5细胞无较明显活性，但随后几天抑制率显著增加。用Giemsa染色法对细胞进行染色，观察细胞形态发生的变化，发现：1.25 μg/mL印楝素 A处理Hi-5细胞1 d后，细胞已无法贴壁，形状变圆，接着细胞形态变得极不规则，有凋亡小体出现。用Ho33342染料对Hi-5细胞核DNA染色，通过荧光显微镜观察发现：经印楝素A处理后第1天，部分细胞核染色体发生异常凝聚，此后异常细胞核比例增多，核膜严重破损。以异硫氰酸荧光素(FITC)荧光染料研究了Hi-5细胞的蛋白质含量变化，发现1.25 μg/mL印楝素A 处理Hi-5细胞1 d后，细胞蛋白质指数(DI)为1.070±0.018，至第3 d DI值上升到1.912±0.019。分析了印楝素A处理后Hi-5的还原性谷胱甘肽(GSH)的相对含量变化，发现1.25 μg/mL处理浓度下，各天处理组GSH抑制率有显著差异。结果显示印楝素A能够抑制Hi-5细胞增殖，影响细胞骨架正常功能，降低细胞活力。