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双烯内酯水解酶基因的克隆和序列分析*
引用本文:钟文辉, 孙明, 何国庆, 冯孝善, 喻子牛,.双烯内酯水解酶基因的克隆和序列分析*[J].微生物学通报,2004,31(3):79-84.
作者姓名:钟文辉  孙明  何国庆  冯孝善  喻子牛  
作者单位:1. 南京师范大学化学与环境科学学院,南京,210097
2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070
3. 浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州,310029
基金项目:国家自然科学基金资助项目(N0.30080013),Preject Granted by Chinese Nationsl Science Fund(No.30080013),农业微生物学国家重点开放实验室开放基金资助项目
摘    要:从土壤中分离到一株降解2,4-二氯酚能力较强的假单胞菌菌株GT241-1,从中克隆出参与降解2,4-二氯酚的双烯内酯水解酶基因(dcpD)。该基因编码的双烯内酯水解酶可将顺式-2-氯双烯内酯水解成2-氯马来乙酸。采用的基因克隆策略是用Southem杂交对其邻近基因进行定位后构建基因组库,再用斑点杂交筛选目的转化子。经序列测定得知dcpD基因编码区702bp。核苷酸和推测编码的氨基酸序列分析表明,dcpD与已在GenBank登记的相关基因有一定的差异。

关 键 词:假单胞菌  2,4-二氯酚  双烯内酯水解酶基因  基因克隆
文章编号:0253-2654(2004)03-0079-06
修稿时间:2003年8月26日

Cloning and Sequence Analysis of Dienelactone Hydrolase Gene
ZHONG Wen-Hui SUN Ming HE Guo-Qing FENG Xiao-Shan YU Zi-Niu.Cloning and Sequence Analysis of Dienelactone Hydrolase Gene[J].Microbiology,2004,31(3):79-84.
Authors:ZHONG Wen-Hui SUN Ming HE Guo-Qing FENG Xiao-Shan YU Zi-Niu
Abstract:A 2,4 -dichlorophenol degrading Pseudomonas strain GI241-1 was isolated from a soil sample. The dienelactone hydrolase gene, designated as dcpD which encodes dienelactone hydrolase involved in transforming cis-2-chloro-dienelactone into 2-chloromaleylacetic acid, was cloned from this bacterium strain. The gene cloning strategy was to construct genomic library after location of its neighbouring gene by Southem blot and to screen the aim transformant by dot blotting. Sequencing results showed that length of dcpD is 702bp. The sequence of dcpD and the deduced amino acid are different from the relative sequences registered in the GenBank.
Keywords:Pseudomonas  2  4-Dichlorophenol  Dienelactone hydrolase gene  Gene cloning
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