| 通过信号肽筛选优化耐高温α-淀粉酶在枯草芽孢杆菌中的分泌 |
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| 引用本文： | 刘金岚,付刚,董会娜,袁向华,张大伟.通过信号肽筛选优化耐高温α-淀粉酶在枯草芽孢杆菌中的分泌[J].工业微生物,2017,47(1). |
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| 作者姓名： | 刘金岚 付刚 董会娜 袁向华 张大伟 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津300308;四川师范大学,成都610000;2. 中国科学院天津工业生物技术研究所,天津,300308;3. 四川师范大学,成都,610000 |
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| 基金项目： | 本课题受国家自然科学基金(21506244;31370089)项目及天津市科技支撑计划重点项目，天津市自然科学基金(16JCYBJC23500;15JCQNJC09500)支持 |
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| 摘 要： | 以大肠-枯草穿梭载体p MA5质粒为基本骨架,以来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌Geobacillus stearothermophilus NUB3621的耐高温α-淀粉酶基因为目标基因,利用POE-PCR法,成功构建针对淀粉酶的信号肽筛选载体。从枯草芽孢杆菌168基因组中扩增得到46个信号肽,利用POE-PCR法,使46个信号肽分别与线性化的筛选载体形成对应的multimer产物,直接转化枯草芽孢杆菌1A751,得到含不同信号肽的重组菌株。发酵结果显示,除了5个与淀粉酶适配性很低的信号肽,其它信号肽均有不同的引导淀粉酶细胞外分泌的能力,其中bgls引导淀粉酶细胞外分泌的能力最强,上清酶活的峰值达1 393.3 U/m L。
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| 关 键 词： | 耐高温 淀粉酶 信号肽 枯草芽孢杆菌 |
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