金鱼生长激素Ⅱ基因在杆状病毒中的表达 |
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作者姓名: | 林广云 龙綮新 黄安林 庞义 余奇理 |
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作者单位: | 中山大学生物防治国家重点实验室,香港大学动物系 |
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基金项目: | 香港研究基金(RGC),广东省自然科学基金 |
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摘 要: | 以pSXIVVI+X3为转移载体,将编码金鱼生长激素Ⅱ的cDNA插入粉纹夜蛾核型多角体病毒(TnNPV)基因组中,构建了重组病毒株TnNPVSX+gfGHⅡ46。该毒株能在草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)离体培养细胞及银纹夜蛾(Agyrogrammaagnata)幼虫中表达金鱼生长激素基因。蛋白免疫印迹表明,表达的生长激素蛋白分子量为22.5kDa,与理论计算值相符,且表达的生长激素可分泌到感染细胞的培养基及虫体血淋巴中。RIA结果表明,表达产物与天然的生长激素有相似的免疫特性,重组病毒在感染细胞96hpi所表达的生长激素达到最高水平,平均每105个细胞可在细胞培养基中检测到金鱼生长激素Ⅱ达86.74ng;平均每克干虫可产生金鱼生长激素Ⅱ214μg。
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关 键 词: | 杆状病毒表达载体系统,金鱼生长激素Ⅱ基因,表达 |
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