抗 HER2-hTNF-α新型免疫毒素的制备及功能研究 |
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作者姓名: | 蒋 琳 冯 静 吴文芳 杨东玲 阎锡蕴 |
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作者单位: | 1. 中国科学院沈阳应用生态研究所,沈阳,110015;中国科学院研究生院,北京,100039 2. 中国科学院生物物理研究所,北京,100101 3. 中国科学院沈阳应用生态研究所,沈阳,110015 |
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摘 要: | HER2/neu 基因在肿瘤中的过度表达使其成为许多肿瘤的标志分子 . 为了增加过度表达 HER2/neu 的肿瘤细胞对肿瘤坏死因子 (TNF) 的敏感性和提高 HER2/neu 抗体的肿瘤杀伤效应,将抗 HER2/neu 单链抗体 C6.5 与人肿瘤坏死因子 hTNF-α融合,构建了 scFvC6.5-hTNF-α融合蛋白,完成了重组蛋白在大肠杆菌中的表达,产率为 400 μg/L 菌液 . 经过亲和层析和柱复性,融合蛋白的纯度达 95%以上 . ELISA 试验表明, scFvC6.5-hTNF-α能够特异结合 HER2/neu 阳性卵巢癌细胞 SKOV-3 和乳腺癌细胞 MCF-7 ,而不结合 HER2/neu 阴性的黑色素瘤细胞 A375. MTT 试验表明, scFvC6.5-hTNF-α能够选择性地杀伤 SKOV-3 和 MCF-7 细胞,而不影响 A375 细胞的生长 . 这种肿瘤细胞特异性杀伤作用提示该免疫毒素具有肿瘤靶向治疗的潜在应用价值 .
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关 键 词: | 抗 HER2/neu 单链抗体,人肿瘤坏死因子,免疫毒素 |
收稿时间: | 2005-04-07 |
修稿时间: | 2005-04-072005-05-27 |
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