| 基于金属有机框架的固定化酰胺酶制备及催化合成(S)-4-氟苯甘氨酸 |
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| 引用本文： | 林超平,汤江涛,郑仁朝,郑裕国.基于金属有机框架的固定化酰胺酶制备及催化合成(S)-4-氟苯甘氨酸[J].生物工程学报,2021,37(8):2936-2946. |
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| 作者姓名： | 林超平 汤江涛 郑仁朝 郑裕国 |
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| 作者单位： | 1 浙江工业大学 生物工程学院 生物有机合成技术研究浙江省重点实验室，浙江 杭州 310014;2 浙江工业大学 生物工程学院 生物转化与生物净化教育部工程研究中心，浙江 杭州 310014 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划 (No. 2017YFE0129400)，浙江省博士后科研择优资助项目 (No. ZJ2020125) 资助。 |
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| 摘 要： | 以微水溶剂热法快速制备的稳定锆基金属有机框架为载体，戊二醛为交联剂，采用交联法对酰胺酶进行固定化，考察了不同条件对酰胺酶固定化效率的影响。结果表明，戊二醛浓度为1.0%、交联时间为180 min、载体与酶的质量比为8︰1，固定化效率最佳，固定化酶活力回收率达86.4%，蛋白负载量达115.3 mg/g。固定化酶最适温度为40 ℃，最适pH值为9.0，在40 ℃下半衰期为72.2 d，该固定化酶的Km为58.32 mmol/L，Vmax为16.23 μmol/(min·mg)，kcat为1 670 s–1。此外，考察了固定化酶催化合成 (S)-4-氟苯甘氨酸的工艺：最适底物浓度300 mmol/L，固定化酶用量10 g/L，反应时间180 min，在最佳反应条件下转化率达49.9%，对映体过量 (Enantiomeric excess，e.e.) 为99.9%。进一步考察了该固定化酶分批催化反应性能，重复使用20批次后，固定化酶活力仍保留95.8%。
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| 关 键 词： | 金属有机框架，酰胺酶，固定化，(S)-4-氟苯甘氨酸 |
| 收稿时间： | 2020/9/25 0:00:00 |
Synthesis of (S)-4-fluorophenylglycine by using immobilized amidase based on metal-organic framework |
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| Chaoping Lin,Jiangtao Tang,Renchao Zheng,Yuguo Zheng.Synthesis of (S)-4-fluorophenylglycine by using immobilized amidase based on metal-organic framework[J].Chinese Journal of Biotechnology,2021,37(8):2936-2946. |
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| Authors: | Chaoping Lin Jiangtao Tang Renchao Zheng Yuguo Zheng |
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| Institution: | 1 Key Laboratory of Bioorganic Synthesis of Zhejiang Province, College of Biotechnology and Bioengineering, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, Zhejiang, China;2 Engineering Research Center of Bioconversion and Biopurification, Ministry of Education, College of Biotechnology and Bioengineering, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, Zhejiang, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | metal-organic framework amidase immobilization (S)-4-fluorophenylglycine |
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