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应用鼠单抗显示鼠组织中特异性抗原的免疫细胞化学方法
引用本文:杨守京,刘彦仿,刘莹莹,朱德生.应用鼠单抗显示鼠组织中特异性抗原的免疫细胞化学方法[J].中国组织化学与细胞化学杂志,1993(2).
作者姓名:杨守京  刘彦仿  刘莹莹  朱德生
作者单位:第四军医大学病理学教研室,第四军医大学病理学教研室,第四军医大学神经科学研究所,第四军医大学动物研究中心 西安 710032,西安 710032,西安 710032,西安 710032
摘    要:作者在应用小鼠抗肾综合征出血热病毒(HFRSV)单克隆抗体(MAbs)免疫细胞化学法定位HFRSV自然感染大鼠组织中的病毒抗原时发现,部分大鼠组织的特异性HFRSV MAbs的染色切片及无关MAb对照和空白对照染色的切片中均出现血液。血细胞,血管壁,单核吞噬细胞系统,肾小球毛细血管及散在的心肌和肝细胞阳性,说明组织中有交叉反应。免疫双扩试验,羊抗鼠IgG桥抗可与大鼠Ig产生免疫沉淀反应,提示,组织中的交叉反应是由桥抗与大鼠细胞中本身存在的Ig(EIg)反应所致。为了避免EIg对特异性病毒抗原染色的干扰,我们以HFRSV MAbs预先分别与二抗羊抗鼠IgG结合,再用正常鼠Ig结合可能存在的二抗中尚未结合MAbs的Fab结合位点,制成一抗分子复合物,并以此作为一个新的相当于羊源性单克隆抗体孵育组织,以抗羊抗体连接羊PAP的多重PAP法显示一抗分子复合物的特异性抗原结合位点,结果显示该方法具有一抗的特异性,以有多重PAP法的敏感性,可有效的避免因EIg产生的交叉反应。用小鼠抗大鼠Kappa轻链MAb按同样方法制备一抗分子复合物用于染色证实,产生交叉阳性的部位确为大鼠组织中的Ig。病毒抗原及Ig的定位结果说明,HFRSV自然感染大鼠组织中的病毒抗原有广泛分布,也存在免疫复合物,但后者有别于HFRS人体组织的分布,另外,心肌及肝细胞Ig阳性说明该组织存在因HFRSV感染所造成的组织损伤,该损伤可能与机体的免疫反应有关。

关 键 词:免疫细胞化学  大鼠  肾综合征出血热  病毒  免疫球蛋白  单克隆抗体  交叉染色

AN IMPROVED IMMUNOCYTOCHEMICAL METHOD FOR DETECTION OF THE SPECIFIC ANTIGENS IN RAT TISSUES BY THE USE OF MOUSE MONOCLONAL ANTIBODIES
Abstract:
Keywords:Immunocytochemistry  Rat  Hemorrhagic fever with renal syndrome  Virus  Immunoglobulin  Monoclonl antibody  Cross reaction
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